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- 2025年07月11日
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培养基：DMEM+10% FBS,不能加双抗+200μg/ml Zeocin
小鼠单核细胞白血病细胞.Raw-Blue注意事项：
1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。
2. 肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（40×,100×,200×各一张）。
3. 将细胞放入37度培养箱中预温1-2小时后再做处理，以稳定细胞状态。
4. 预热培养基（含10%胎牛血清，1%双抗）。
5. 若细胞密度较小，无菌操作，去掉培养基。每瓶添加第四步中准备的5-6ml培养基。放到37度培养箱培养。待细胞密度达到80%以上，进行传代。
6. 若细胞密度较大，达到80%以上，将细胞传到10cm培养皿培养。
7. 传代时，T25瓶里保留部分细胞，同步培养，直到能确保10cm培养皿中的细胞状态良好。
我们。
小鼠单核细胞白血病细胞.Raw-Blue原代：
原代细胞的培育是指直接从机体取下细胞、安排和器官后当即进行培育。因而，较为严格地说是指成功传代之前的培育，此刻的细胞坚持原有细胞的根本性质，如果是正常细胞，依然保存二倍体数。但实际上，通常把第一代至第十代以内的培育细胞统称为原代细胞培育。[1]
最常用的原代细胞的培育有安排块培育和涣散细胞培育。
安排块培育是将剪碎的安排块直接移植在培育瓶壁上，参加培育基后进行培育。
涣散细胞培育大致进程为：
将动物安排从机体中取出离散成单个细胞(常用胰蛋白酶)，置适宜的培育基中培育，使细胞得以生计、成长和繁衍(注意全部进程无菌)。
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MOI 值 50-200，puromycin 常规剂量 1-2 µg/mL；一般不需要加助转剂 polybrene。 ②Jurkat 细胞 Jurkat 细胞是一种常用的人类T细胞白血病细胞系，是一种悬浮细胞。慢病毒感染悬浮细胞步骤可以参考上文。 Jurkat 细胞感染慢病毒的 MOI 以 50-80 为宜，一般不需要加助转剂 polybrene。 图 6：慢病毒感染 Jurkat 细胞 ③RAW264.7 细胞 RAW264.7 中文全名为小鼠单核巨噬细胞白血病细胞，属贴壁细胞，最好的形态呈现
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