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种 属:人
培养基:1640+10% FBS
人膀胱移行细胞癌细胞.T24注意事项:
1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。
2. 肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(40×,100×,200×各一张)。
3. 将细胞放入37度培养箱中预温1-2小时后再做处理,以稳定细胞状态。
4. 预热培养基(含10%胎牛血清,1%双抗)。
5. 若细胞密度较小,无菌操作,去掉培养基。每瓶添加第四步中准备的5-6ml培养基。放到37度培养箱培养。待细胞密度达到80%以上,进行传代。
6. 若细胞密度较大,达到80%以上,将细胞传到10cm培养皿培养。
7. 传代时,T25瓶里保留部分细胞,同步培养,直到能确保10cm培养皿中的细胞状态良好。
我们。
人膀胱移行细胞癌细胞.T24原代:
原代细胞的培育是指直接从机体取下细胞、安排和器官后当即进行培育。因而,较为严格地说是指成功传代之前的培育,此刻的细胞坚持原有细胞的根本性质,如果是正常细胞,依然保存二倍体数。但实际上,通常把第一代至第十代以内的培育细胞统称为原代细胞培育。[1]
最常用的原代细胞的培育有安排块培育和涣散细胞培育。
安排块培育是将剪碎的安排块直接移植在培育瓶壁上,参加培育基后进行培育。
涣散细胞培育大致进程为:
将动物安排从机体中取出离散成单个细胞(常用胰蛋白酶),置适宜的培育基中培育,使细胞得以生计、成长和繁衍(注意全部进程无菌)。
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文献和实验我养的是膀胱癌 T24细胞(贴壁的)心得如下:1、 T24长的非常快,传代一般1:5传,每4天需要再传。2、虽然是永生化细胞,也一定不要等细胞100%汇合再传代,多次这样细胞状态不好,球形增加,还不容易洗掉。3、要用胰酶(0.25%)--EDTA(0.01%)混合消化液消化好些,一般1分钟内呈球形,即可混悬细胞了。4、培养液用10%小牛血清的DMEM或1640都可以。步骤:吸净培养液, PBS洗2次,加消化液室温一分钟左右,要在显微镜下注意观察,不要过头,球形后,吸掉消化液,加1毫升培养
性癌到高度未分化的浸润性癌。其中约70%为分化良好的乳头状癌,25%~30%为分化程度不同的浸润性癌。根据癌细胞分化程度不同,将移行细胞癌分为三级。 (1)移行细胞癌Ⅰ级:癌组织呈乳头状,乳头表面被覆的移行上皮较厚,细胞层次较多,缺乏从底层到表层由柱状细胞到扁平细胞逐渐分化的现象。细胞核大小不甚一致,有些较大染色较深。核分裂像可见,有的局部区域稍多,且不限于基底层(图12-32)。有些癌细胞可浸润固有膜。 图12-32 膀胱移行细胞癌 Ⅰ级 肿瘤乳头状,被覆上皮细胞
为分化程度不同的浸润性癌。根据癌细胞分化程度不同,将移行细胞癌分为三级。 (1)移行细胞癌Ⅰ级:癌组织呈乳头状,乳头表面被覆的移行上皮较厚,细胞层次较多,缺乏从底层到表层由柱状细胞到扁平细胞逐渐分化的现象。细胞核大小不甚一致,有些较大染色较深。核分裂像可见,有的局部区域稍多,且不限于基底层(图12-32)。有些癌细胞可浸润固有膜。 图12-32 膀胱移行细胞癌 Ⅰ级 肿瘤乳头状,被覆上皮细胞层次增多,部分排列不整齐,核大小不甚一致
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