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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
密封干燥保存
- 保质期:
6个月
- 库存:
1000
- 供应商:
钰博生物
- SDS裂解液产品简介:
1. 我们生产的SDS裂解液(SDS Lysis Buffer)是一种比较强烈的细胞组织裂解液。SDS裂解液裂解得
到的蛋白样品可以用于常规的Western、ChIP(染色质免疫共沉淀,chromatin
immunoprecipitation)等。
2. SDS裂解液的主要成分为SDS,sodium pyrophosphate,β-glycerophosphate,sodium
orthovanadate,sodium fluoride,EDTA,leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白降解。
3. 用SDS裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用我们生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由
于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。 - SDS裂解液使用方法:
对于培养细胞样品:
1. 取适当量的 SDS 裂解液混匀,在使用前数分钟内加入 PMSF(货号 WB0114),使 PMSF 的最终
浓度为 1mM。
2. 对于贴壁细胞,去除培养液用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍,加入适量裂解液,用枪吹打
数下,使裂解液和细胞充分接触,轻轻的摇晃约 5-10 分钟,充分裂解后,10000-14000g 离心 10 分钟,
取上清,即可进行后续操作。
裂解液用量说明: 用于不同规格标准培养板裂解液容量
板规格/表面积 试剂容量
100mm 500-1000μι
60mm 250-500μι
6-well plate 200-400μιper well
24-well plate 100-200μιper well
96-well plate 50-100μιper well
3. 对于悬浮细胞,离心收集细胞,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍,加入适量裂解液,用枪
吹打把细胞吹散,用手指轻弹或旋涡震荡 5-10 分钟以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞
沉淀。如果细胞量较多,必需分装然后再裂解,充分裂解后,10000-14000g 离心 10 分钟,取上清,
即可进行后续操作。
对于组织样品:
1.手术切除的组织块迅速置于预冷的生理盐水中,漂洗数次,以清洁表面的血迹,将组织称量后切成
几个较小的组织块放入组织匀浆器中。
2. 取适当量的 SDS 裂解液混匀,在使用前数分钟内加入 PMSF,使 PMSF 的最终浓度为 1mM。
3. 按组织净重(g):裂解液(ml)=1:10 的比例,加入相应体积的裂解液进行匀浆(如果裂解不充分可
以适当添加更多的裂解液 如果需要高浓度的蛋白样品 可以适当减少裂解液的用量) 。
4. 用匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 离心 3- 5 分钟,取上清,即可进行后续作。
注:SDS 裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因
组 DNA 等的复合物。在不检测和基因组 DNA 结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清
用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶
状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如 NF-kappaB、p53 等时,
通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。
SDS裂解液注意事项:
1. 抽提蛋白的所有步骤都需在冰上或 4℃进行,建议将样品分装成合适的量,然后冷冻干燥或直接
以液体状态置-80℃中保存,不要反复冻融。
2. 需自备 PMSF, 建议在临用前数分钟内加入 PMSF。 - SDS裂解液yb-2511R ACHE乙酰胆碱酶抗体 浓度1mg/ml
yb-9527R ALAS15-氨基乙酰丙酸合酶1抗体 浓度1mg/ml
yb-1697R alpha Defensin 1防御素α1/3抗体 浓度1mg/ml
yb-1727R ABCG4ABC膜转运蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-2221R ATEXPA10植物延长蛋白(拟南芥) 浓度1mg/ml
yb-2251R A RafA-Raf抗体 浓度1mg/ml
yb-3371R Phospho-A Raf(Ser299)磷酸化A-Raf抗体 浓度1mg/ml
yb-9517R AMPD3红细胞腺苷脱氨酶3抗体 浓度1mg/ml
yb-2410R ABP雄激素结合蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-1576R ALR肝再生增强因子抗体 浓度1mg/ml
yb-0112R Amyloid Precursor ProteinAPP/ABPP淀粉样肽前体蛋白抗体 浓度1mg/ml
ybm-1621M AFP(A2)甲胎蛋白单克隆抗体(包被) 浓度1mg/ml
ybm-1622M AFP(A4)甲胎蛋白单克隆抗体(检测) 浓度1mg/ml
yb-1477R ARFIP1 ADP核糖基化因子结合蛋白1抗体 浓度1mg/ml
yb-1416R AHR芳香烃受体抗体 浓度1mg/ml
yb-1528R ATRN吸引素抗体 浓度1mg/ml
yb-1627R ABCA1腺苷三磷酸结合盒转运体A1抗体 浓度1mg/ml
yb-2056R AKT2蛋白激酶B2 浓度1mg/ml
yb-0677R Angiopoietin 2血管生成素2抗体 浓度1mg/ml
yb-0114R Aromatase芳香化酶/细胞色素P450/雌激素合成酶抗体 浓度1mg/ml
yb-1456R Adenosine Receptor A2a腺苷A2A受体抗体 浓度1mg/ml
yb-1473R AKAP95蛋白激酶A锚定蛋白95抗体 浓度1mg/ml
yb-4189R ASBT顶膜钠依赖性胆盐转运体蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-4195R ADAM8去整合素样金属蛋白酶8抗体 浓度1mg/ml
yb-11386R AADACL3芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白3抗体 浓度1mg/ml
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文献和实验SDS Gel Electrophoresis of Tubulin\MAPs
(1:3 dilution of stock) 0.375 M Tris-HCl (pH 8.8) 0.1 % SDS Stacking Gel (Final Concentrations) 3 % acrylamide (1:10 dilution of stock) 0.125 M Tris-HCl (pH 6.8) 0.1% SDS Electrode
SDS-PAGE Western Blotting Protocols
cells or fruiting bodies. Klett 100 cells are at a density of 5E8. 2. Pellet at RT for 1-2’ and remove s/n. 3. Extract protein by SDS/Urea Method, TCA-precipitation, or sonication. 4. Measure [protein] by Bradford (use 1-2 ul of each sample
师赠王老吉 在提取血中DNA时,细胞裂解液是指?平常的细胞裂解液,还是白细胞或者红细胞的裂解液? liushan8_9 白细胞或者红细胞的细胞膜应该是一样的吧。 yyf87255300 在提取外周血DNA时,成熟的红细胞内没有核,所以裂解的外周血的白细胞,我们实验室用的裂解液是三蒸水 zjubell 师赠王老吉 wrote:
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