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上海乔羽生物有限公司
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100ml/200ml/500ml
标准小牛血清(无菌未经灭活)
产品货号:QY-ES338
标准小牛血清(无菌未经灭活)主要成本以及鉴别方式:
血清是由血浆去除纤维蛋白原而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。它主要由水和各种化学成分组成,这些化学成分包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶等。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。
血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被激活,血液迅速凝固,形成胶冻。凝血块收缩,其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清,也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中,纤维蛋白原转变成纤维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆最大的区别。而在凝血反应中,血小板释放出许多物质,各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化,如凝血酶原变成凝血酶,并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析,都以血清为样品。
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文献和实验血清,将两份血清对比,发现高温直接影响到血清所含的抗体蛋白。在56℃下灭活半小时以上,肯定也会对里面的蛋白起到破坏作用。下次有机会我做个延长灭活时间的实验试试,看看到底有多大的影响。热灭活之后,血清放在四度冰箱久了,就会有沉淀产生,这常常会被认为是微生物污染或者是黑胶虫污染。为了验证到底有没有污染,常常又会把血清放置37℃温育,但是血清中的蛋白会进一步析出,最后还是要做镜检,无菌培养试验,和革兰氏染色试验,非常麻烦。我看过一份资料,里面提到70%的实验者认为灭活是理所当然的。常规灭活建议的温度
;4℃冰箱或冷库溶解24小时→室温下全溶后再分装,一般以50 ml无菌离心管中分装40-45ml。使用过程中要特别注意,必须规则地将血清摇晃均匀,小心勿造成气泡,使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由-20℃放置至37℃环境下解冻,因为温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而产生沉淀。 3、血清的灭活(heat-inactivation)一般是指56℃,30分钟水浴加热已完全解冻的血清,加热过程中必须规则地摇晃均匀。此处理的目的是使血清中的补体成分(complement)去活化
保存(-20℃)。临用前将加入小牛血清(10%~20%)。 9)每次配液时,需要的其他辅助性液体(Hanks,胰蛋白酶消化液,PBS ,抗生素溶液等)也可以同时配制,分别过滤。 10)市售小牛血清使用前都应该灭活(56℃,30min),以消除补体活性。动物血清个体差异大,故而每一批血清都进行严格检测,同时进行无菌试验。优质血清应该为淡黄色,透明,无溶血,无沉淀,灭活后颜色稍深。生化检测总蛋白含量3.5~4.5g/100ml,球蛋白不高于2g/100ml。选定一个效果较好的批号
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