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室温,密闭
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100
- 供应商:
上海乔羽生物科技有限公司
- 规格:
1L,10×1L,250g(其他规格电询)
货号:QY-ED2242
用途:科研实验
品牌:上海乔羽
乔羽生物主要供应elisa试剂盒、生物试剂、抗体,培养基等科研产品,以保证产品质量和市场需求率为主要目标,争取能在科研生命道路上能够长久的服务于广大新老客户。优惠的产品,便捷的服务,欢迎新老客户来电订购优质产品!
染色液,胰蛋白酶-EDTA溶液(0.05%:0.02%,含酚红)优点:
一、高效、灵敏、特异的抗体
二、稳定的重复性和可靠性
三、最大限度的节省实验经费
四、技术服务:专业,及时,耐心
安全:
避免直接接触终止液和底物。如不小心接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴接触试剂盒里的任何成份。
染色液请远离儿童。
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文献和实验问:请问哪位仁兄能告知一下EDTA-胰蛋白酶的配制。急用!多谢!答:1、胰酶是0.25%,这是质量体积比,就是说0.25g胰酶溶于100ml PBS,注意,尽量不要用水来溶,因为要保持渗透压。2、EDTA的工作液溶度是0.02%-0.1%,根据细胞消化的难易程度自己调整。EDTA并不是必须的,容易消化的细胞可不加。EDTA对细胞贴壁性有影响,因此使用时要甚重。如果影响贴壁,但消化时必须要用,那么在用完全培养基终止消化后,可离心弃上清,再加完全培养基培养,可去除EDTA。如果对贴壁没
干净; 将组织置于平皿中,用眼科剪刀剪成小颗粒(1~2 mm3); 加入 30 倍组织量的蛋白酶溶液(0.1% 胰蛋白酶和 0.02%EDTA 等比混合); 移液管转至三角烧瓶,置于37℃水浴或者恒温箱中消化 20~60 min,每隔5~10 min震荡一次。若需消化较长时间,可每隔 15 min 将 2/3 的消化上清液转移到离心管中冰浴或离心去除消化液,加入含血清培养基终止消化,另补充新的消化液至三角烧瓶中继续消化; 将消化液或分批收集的细胞悬液经 200~300 目的滤网过滤,300 g
,在0.1毫升细胞悬液中加0.1毫升0.4%的台盼兰溶液。轻轻混匀,数分钟后,用血球计数板计数细胞。活细胞排斥台盼兰,因而染成蓝色细胞是死细胞。 34. 培养基中丙酮酸钠的作用是什么? 丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源,尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是,如果没有葡萄糖的话,细胞也可以代谢丙酮酸钠。 35. 二价离子抑制胰蛋白酶活性吗?使用胰蛋白酶时加入EDTA的目的是什么? 二价离子的确抑制胰蛋白酶活性。EDTA用来螯合游离的镁离子和钙离子
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