兔抗人精氨酸加压素诱​​导的1多克隆抗体

兔抗人精氨酸加压素诱​​导的1多克隆抗体
1．提取的动物Ig
2．弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
3．青霉素和链霉素
4．实验动物 兔
5．其它材料及试剂

上海笃玛生物兔抗人精氨酸加压素诱​​导的1多克隆抗体操作方法
1．免疫方法 可以采用以下各种方法之一进行免疫。
（1）淋巴结注射法：
①在兔的两后足跖部皮下（或皮内）注射活卡介苗50mg （每侧约0.30ml）。7～10天后，兔跖及腘肌淋巴结肿大；
②于肿大的两侧淋巴结内各注射加有完全佐剂的IgG乳化抗原0.50ml(含IgG 5mg/ml、青霉素1 000U/ml、链霉素1 000μg/ml)；③必要时，14天后，重复步骤②一次；④再过7天后，于两侧淋巴结内各注射加有完全佐剂的IgG乳化抗原0.50ml（含IgG5mg/ml、青霉素1 000U/ml、链霉素1 000μg/ml）；⑤5～7天后，耳静脉采血。测定血清效价。

（2）皮下多点注射法：
①家兔两侧掌（跖内各注射含有完全佐剂抗原0.10ml（IgG含量5mg/ml）；
②7～10天后，脊柱两侧多点（颈、胸、腰椎各两点、共6点）皮下注射含不完全佐剂的抗原，每点0.50ml；
③7～10天后，脊柱两侧重复注射一次；
④7～10天后试血。不合格者重复步骤③。
（3）多途径联合注射法：
①两侧掌（跖）内侧皮下注射含完全佐剂抗原0.50ml（IgG量为5mg/ml）；
②14天后，多点皮下注射含有不完全佐剂抗原；
③7天后，耳 静脉注射不含佐剂的抗原2ml；
④测定血清抗体效价，不合格者重复步骤③，并适当递增IgG量。

2．效价测定 采用琼脂扩散法。
⑴ 将血清倍比稀释，加入外周孔。
⑵ 中间孔加动物Ig。
⑶ 37℃湿盒琼扩24小时，观察结果。


上海笃玛生物兔抗人精氨酸加压素诱​​导的1多克隆抗体结果判定
1．抗Ig的效价测定 琼脂扩散效价达1﹕16或1﹕32者为合格。
2．纯度鉴定 采用琼扩法。中间孔加抗Ig血清，外周孔加Ig和标准品Ig。在抗Ig与Ig以及标准品Ig均出现一条沉淀线，且这两条沉淀线相互融合者，说明提取的Ig是纯的。


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