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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
密封干燥保存
- 保质期:
6个月
- 英文名:
3:1Agarose
- 库存:
1000
- 供应商:
钰博生物
琼脂糖(Agarose)是纯化的线性半乳聚糖亲水胶体,提取自琼脂或者含琼脂的海藻,结构上是一种线性聚合物,由β-D-吡喃半乳糖(1-4)连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基构成。作为一种凝胶试剂,常用于通过凝胶电泳或者印迹法(如Northern或Southern)来进行日常核酸分析,也适用于蛋白应用,如辐射状免疫扩散(RID)实验。
本品为3:1 琼脂糖,与常规琼脂糖相比,对PCR产物,小片段DNA(1000bp以下)具有很高的分辨率。此外,还具有如下特点:1)易溶解,胶液更清澈,可以配制高达5%的凝胶;2)很低的背景;3)品质稳定等。
琼脂糖的基本参数,包括:
1) 硫酸盐含量(sulfate content)——纯度指标,因为硫酸根是存在琼脂糖内的主要离子基团;
2) 凝胶强度(gel strength)——施加于凝胶使之断裂的外力;
3) 胶凝点(Gel point)——水溶性琼脂糖溶液冷却后形成凝胶时的温度。液体向凝胶转化的过程中,琼脂糖溶液具有滞后性,因此,胶凝点不等同于胶熔点。
4) 电渗(EEO)——液体穿透凝胶的一种电动运动。琼脂糖凝胶内的阴离子基团吸附在基质上不会发生迁移,但是解离的阳离子就会朝负极迁移,从而产生电渗。由于生物聚合物的电泳迁移通常是朝负极运动,则EEO产生的内部对流会干扰分离效率。
3:1Agarose 翊圣3:1琼脂糖产品性质
外观(Appearance)
白色粉末
凝胶强度(Gel Strength)
≥650g/cm2(1.5% gel)
凝胶温度(Gel Point)
≤36℃(1.5% gel)
融胶温度(Melting Point)
≤80℃(1.5% gel)
电渗值(EEO, -mr)
≤0.10
外观(Appearance)
无色清澈胶液
硫酸盐(Sulfate, %)
≤0.10%
水分(Moisture)
≤10%
灰分(Ash Content)
≤0.5%
DNA酶(DNase)
Not detected
RNA酶(RNase)
Not detected
蛋白酶(Protease)
Not detected
核酸内切酶(Endonuclease)
Not detected
运输和保存方法
室温运输。室温干燥保存。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3:1Agarose 翊圣3:1琼脂糖使用方法
1) 配制适量电泳及制胶用的缓冲液(根据电泳需要,配制合适浓度的电泳及制胶缓冲液),倒入合适三角瓶中。【注意】:用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的。
2)根据制胶量及凝胶浓度,加入准确称量的琼脂糖粉(总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量)。
3)在微波炉中加热溶解琼脂糖,设置中火加热至沸腾,保持胶液沸腾约 30s,戴上防热手套,移开三角锥瓶,小心摇动三角锥瓶,重悬未溶解颗粒,再次用高火加热1分钟(或加热直至琼脂糖完全溶解)。请戴上防热手套,小心摇动三角锥瓶,使琼脂糖胶液充分均匀。
【注意】:必须保证琼脂糖充分完全溶解,此时琼脂糖胶液清澈,否则,会造成电泳图像模糊不清。加热时如胶液剧烈沸腾发泡,停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。
4)使溶液冷却至60℃左右,如需要可在此时加入溴化乙锭(EB)溶液使其终浓度为0.5µg/ml,并充分混匀。
【注意】:溴化乙锭是一种致癌物质。使用含有溴化乙锭的溶液时,请戴用手套。建议使用我司提供的EB无毒替代品(YeaRed 核酸染料,Cat# 10202),使用时仅需用制胶缓冲液稀释至1×工作液即可。
5)将琼脂糖溶液倒入制胶模具中,在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在3-5mm之间。
6)在室温下使胶凝固(大约30min-1h),然后放置于电泳槽中进行电泳。
【注意】:凝胶不立即使用时,请用保鲜膜将凝胶包好后在4℃下保存,一般可保存 2~5 天。
琼脂糖浓度与DNA分离范围
线性DNA片段大小(bp)
10-100bp
100-500bp
500-1000bp
琼脂糖浓度(%),1×TAE Buffer
6.0
4.0
3.0
琼脂糖浓度(%),1×TBE Buffer
5.0
3.0
2.0
3:1Agarose 翊圣3:1琼脂糖yb-506 人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293)
yb-507 人胚胎眼巩膜成纤维细胞
yb-508 人胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞
yb-509 小鼠白血病细胞
yb-510 小鼠白血病细胞
yb-511 小鼠白血病细胞
yb-512 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞
yb-513 大鼠嗜碱性细胞白血病细胞
yb-514 小鼠淋巴样瘤细胞
yb-515 小鼠白血病克隆细胞系
yb-516 小鼠白血病细胞G-CSF依赖性
yb-517 小鼠肥大细胞癌细胞
yb-518 小鼠肺癌细胞
yb-519 小鼠肺癌细胞
yb-520 小鼠胃癌细胞
yb-521 小鼠艾氏腹水癌细胞
yb-522 小鼠腹水瘤细胞
yb-523 小鼠腹水瘤细胞
yb-524 小鼠乳腺癌高转移细胞
yb-525 小鼠乳腺肿瘤细胞
yb-526 大鼠乳腺癌细胞
yb-527 小鼠骨髓瘤细胞
yb-528 鼠骨髓瘤细胞
yb-529 小鼠骨髓瘤细胞
yb-530 小鼠骨髓瘤细胞
yb-531 小鼠骨髓瘤细胞
yb-532 小鼠淋巴瘤细胞
yb-533 小鼠淋巴瘤细胞
yb-534 小鼠淋巴瘤细胞
yb-535 小鼠黑色素瘤细胞
yb-536 鼠黑色素瘤细胞系
yb-537 小鼠黑色素瘤高转移细胞
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文献和实验Materials: agarose solution in TBE or TAE (generally 0.7-1%) 1X TBE or TAE (same buffer as in agarose) gel loading dye
实验概要 Separating nucleic acid fragments by agarose gel electrophoresis. 实验原理 Agarose gel electrophoresis remains the most widely used technique for separating nucleic acid fragments due to its ease of use, non
Capillary Blotting of Agarose Gels
Southern blotting is a well-known technique (1 ). DNA is cleaved with restriction enzymes (Chapter 2 ) to produce fragments that are fractionated according to their size in an agarose gel (Chapter 3 ). The DNA is then partially cleaved
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