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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
上海古朵生物有限公司
- 检测范围:
科研
- 检测方法:
酶联检测
- 适应物种:
小鼠
- 规格:
48T/96T
膀胱肿瘤抗原ELISA
货号:GD-NB3019
规格:48T/96T
运输条件:2-8℃低温运输,用干冰或者冰袋低温运输。
待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等。
膀胱肿瘤抗原ELISA操作步骤:
1)取出试剂盒,室温(20-25℃)放置30分钟。
2)分组:取出96孔板,根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组(6个浓度)、空白孔、待测样品组。
3)标准品的稀释:准备小试管6 只,依次编好号码,先在各小试管中加入标准品稀释液100ul,然后取原浓度标准品100ul加入一只已编好号的试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第二支试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul加入第三只试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第四只试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul加入第五只试管中,充分混匀;然后在该试管中取100ul,弃掉。第六只试管作为0 号标准品。
注:为减少实验误差,保证准确性,建议设置复孔。
4)加样:依照标准品的顺序分别加入50ul的标准品溶液于空白微孔中;空白对照孔加入50ul的蒸馏水;其余微孔中先加样品40ul然后再加生物素标记的抗体10ul。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
5)温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
6)洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒弃去,如此重复5 次,拍干。
7)加酶标溶液:标准品组、待测样本组各孔中加入50ul的酶标溶液(空白对照孔除外)。
8)温育:酶标板用封板纸密封后,放入湿盒内于37℃恒温孵育1小时。
9)洗板:用稀释后的洗涤液注满每孔,静置15-30s,充分清洗酶标板5次,用吸水纸彻底拍干。
10)显色:各孔加入显色剂A液50ul后,再加入显色剂B液50ul。
11)终止:25-37℃下避光反应10-15分钟,加入50ul终止液。
12)读板:在450nm波长读取各孔的OD值。
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文献和实验——组成①蛋白质:普通蛋白质——生物发生:细胞溶质蛋白、细胞膜融合和转运相关蛋白、信号转导蛋白、热休克蛋白、四次跨膜超家族等;细胞特异性蛋白质——特定功能:免疫球蛋白超家族、共刺激分子、肿瘤抗原等。②胆固醇与脂类富含胆固醇;脂类:鞘磷脂、磷脂酰丝氨酸、神经节甘苷脂等③核酸携带的 mRNA 成分可以进入细胞浆中可以被翻译成蛋白质;exosomes 所转移的 microRNA 在进入靶细胞后可以靶向调节细胞中 mRNA 的水平。3. 外泌体的产生与生物学特性——生理功能细胞通讯功能:①免疫调节②凋亡③
能力很强,它们会离开蜗牛,游到水里寻找新的人类或动物宿主。尾蚴穿透皮肤,转化为血吸虫,进入血管,迁移到肺。在肺内,它们再次转化,迁移到肝脏,形成一个吸盘,开始吸血。在这里,它们也形成雄性和雌性配对,准备繁殖,并迁移到膀胱或肠道周围的血管,在那里它们进行交配,并将卵释放到尿液和粪便中。当人们在被含有虫卵的尿液或粪便污染的水中涉水或游泳时,如果存在正确的蜗牛寄主种类,他们就会受到感染。曼氏血吸虫(非洲和南美洲)、夹层血吸虫(非洲)和日本血吸虫及湄公河血吸虫(亚洲)引起肠道静脉感染,而血吸虫(非洲)感染膀胱
发生率增多。然而,其肿瘤类型仅为淋巴网状肿瘤(网状细胞肉瘤、淋巴肉瘤),其他肿瘤的发生率并无明显增高。至今人们对该学说仍有争议,肿瘤的免疫监视学说还有待进一步证实。七十年代层掀起一次肿瘤免疫治疗高潮,是以非特异性免疫治疗为主。最具代表性的是采用细菌制剂,如:卡介苗(BCG)、短小棒状杆菌(C. Pavum)。经过几年的研究,除了用BCG膀胱灌注治疗膀胱癌获得明显疗效外,人们对它们逐渐失去了兴趣,因为对其他肿瘤远期疗效并未显著提高,甚至有些结果还不如对照组。同时因未找到人类肿瘤特异性抗原,人们对免疫
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