DAPI溶液

DAPI溶液产品描述

DAPI，也称DAPI dihydrochloride，是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB(ethidium bromide)相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。因为DAPI是含有特定AT序列DNA的一种嵌入剂，它能像Hoechst染料一样粘附在DNA双螺旋的小沟区。尽管DAPI不能通过活细胞膜，但却能穿透扰乱的细胞膜而对核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用来检测酵母线粒体DNA，叶绿体DNA，病毒DNA，microplasm DNA以及染色体DNA。DAPI-DNA复合物的激发和发射波长分别为360nm和460nm。

DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。

本产品浓度已经过优化，确保可以满足各种常规染色的需要。如需使用特定浓度的DAPI，请选购DAPI（Cat No.40727ES10）或DAPI染液（5mg/ml）（Cat No. 40728ES03）。

DAPI溶液产品性质

中文名称：

4’,6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐

英文名称：

4’,6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride

CAS：

28718-90-3

分子式：

C16H17Cl2N5

分子量：

350.25

DAPI最大激发波长：

340nm

DAPI最大发射波长：

488nm

DAPI-DNA最大激发波长：

364nm

DAPI-DNA最大发射波长：

454nm

运输与保存方法

冰袋运输。溶液在4ºC保存，有效期六个月。

注意事项

1)DAPI对人体有一定刺激性，请注意适当防护。

2)荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。

3)为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

4)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

DAPI溶液使用方法

1.固定的细胞或组织染色：对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。DAPI染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色，则直接进行DAPI 染色。

a)对于贴壁细胞或组织切片：加入适量DAPI染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。

b)吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。

c)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360nm，发射波长460nm。

2.活细胞或组织染色：

a)细胞培养物中加入适量DAPI染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液，对于96孔板一个孔需加入100μl染色液。

b)在 37℃培养细胞 10～20 分钟。

c)用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。

直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360nm，发射波长460nm
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