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上海哈灵生物科技有限公司
软琼脂细胞克隆试剂盒操作体会:
1. 控制好染色步骤;
2. 组织固定起着很重要的作用,根据不同的固定溶液可延长或缩短染色时间; 3. 0.2%水溶溶液洗,可使色调清晰鲜艳;
3. 磷钼酸水溶溶液对丽春红、酸性复红有分化作用,分化时镜下控制, 肌纤维和纤维素呈红色,胶原纤维呈淡粉红色即可。
软琼脂细胞克隆试剂盒产品优势:
哈灵生物供应的提供该产品报价及使用说明书、原理、资料下载,同时我们承诺质量保证,提供实验技术支持。如产品有任何产品质量问题,无条件退换(非人为因素造成)。且我司提供的产品实验效果好,节省经费,更有上海客户提供送货服务,我司有完整的营销体系,保证了售前、售后问题,让您实验轻松完成。、
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| HL10088.3 | 细胞培养污染性支原体M.fermentans鉴定16S rDNA PCR扩增检测试剂盒 | 20次 |
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| 细胞培养基片剂专题 | ||
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| HL12322.1 | DMEM培养基 | 1/10升(片剂) |
| HL12322.2 | RPMI1640培养基 | 1/10升(片剂) |
| HL12322.3 | MEM培养基 | 1/10升(片剂) |
| HL12322.4 | M199培养基 | 1/10升(片剂) |
| HL12322.5 | GMEM培养基 | 1/10升(片剂) |
| HL12322.6 | DMEM/F12培养基 | 1/10升(片剂) |
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| HL12322.8 | LEIBOVITZ’S L15培养基 | 1/10升(片剂) |
| HL12322.9 | ISCOVE’S MDM培养基 | 1/10升(片剂) |
| HL12322.10 | GRACE’S 昆虫培养基 | 1/10升(片剂) |
| 干细胞检测试剂专题 | ||
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| HL12063 | 胚胎干细胞(ES)基础培养基 | 500毫升 |
| 现HL12064 | 小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)完全培养基(无说明书) | 500毫升 |
| 现HL12199.1 | 人体胚胎干细胞完全培养基 | 100毫升 |
| 现HL12199.2 | 小鼠胚胎干细胞完全培养基 | 100毫升 |
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| HL10071 | 滋养细胞法胚胎干细胞繁殖试剂盒 | 10次 |
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| HL10332.2 | 基质胶体法小鼠胚胎干细胞繁殖试剂盒 | 10次 |
| HL10332.3 | 基质胶体法大鼠胚胎干细胞繁殖试剂盒 | 10次 |
| HL10345 | 胶原蛋白酶消化试剂盒 | 20毫升 |
| HL10105 | 干细胞成脂分化潜力定性染色试剂盒 | 20/100次 |
| 现HL10106 | 干细胞成脂分化潜力比色法定量检测试剂盒 | 20/100次 |
| 现HL10001.3 | 胚胎干细胞(ES)冻存试剂盒 | 50次 |
| HL10281 | 胚胎干细胞分化定性检测试剂盒 | 20次 |
| HL10282 | 胚胎干细胞未分化定性荧光检测试剂盒 | 10次 |
| HL10283 | 胚胎干细胞内胚层(endoderm)细胞分化荧光检测试剂盒 | 10次 |
| HL10284 | 胚胎干细胞中胚层(mesoderm)细胞分化荧光检测试剂盒 | 10次 |
| HL10285 | 胚胎干细胞外胚层(ectoderm)细胞分化荧光检测试剂盒 | 10次 |
| HL10286 | 胚胎干细胞心肌细胞(cardiomyocyte)定向分化试剂盒 | 5次 |
| HL10287 | 胚胎干细胞神经细胞(neuron)定向分化试剂盒 | 5次 |
| HL10288 | 胚胎干细胞内皮细胞(endothelial)定向分化试剂盒 | 5次 |
| HL10289 | 胚胎干细胞造血细胞(hematopoitic)定向分化试剂盒 | 5次 |
| HL10290 | 胚胎干细胞胰岛细胞定向分化试剂盒 | 5次 |
| HL10322 | 肿瘤干细胞荧光定性检测试剂盒 | 20次 |
| 组织细胞分离培养试剂专题 | ||
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| 现干HL10068.1 | 动物肝星状细胞分离培养试剂盒 | 5次 |
| 现干HL10068.2 | 动物肝细胞分离培养试剂盒 | 5次 |
| HL10291 | 动物新生心肌细胞分离培养试剂盒 | 5次 |
| HL10292 | 动物脂肪组织细胞分离培养试剂盒 | 10次 |
| HL10293 | 动物肾上腺组织细胞分离培养试剂盒 | 10次 |
| HL10294 | 动物骨组织细胞分离培养试剂盒 | 10次 |
| HL10295 | 动物脑组织细胞分离培养试剂盒 | 10次 |
| HL10296 | 动物软骨组织细胞分离培养试剂盒 | 10次 |
| HL10297 | 动物直肠组织细胞分离培养试剂盒 | 10次 |
| HL10298 | 动物内皮细胞分离培养试剂盒 | 10次 |
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文献和实验7~10mL),冷却凝固,可作底层琼脂置CO2温箱中备用。 (4)按1:1比例让0.7%的琼脂糖和2×DMEM培养基在无菌试管中相混以后,再向管中加入0.2mL的细胞悬液,充分混匀,注入铺有1.2%琼脂糖底层平皿中,逐形成双琼脂层。待上层琼脂凝固后,置入37℃ 5%CO2温箱中培养10~14天。 (5)把平皿放置在倒置显微镜下,观察细胞克隆数。计算形成率。 软琼脂培养法常用检测肿瘤细胞和转化细胞系。试验中琼脂与细胞相混时,琼脂温度不宜超过40℃。接种细胞的密度每平方厘米不超过35
的特性,将肿瘤细胞混入琼脂液中,琼脂液凝固使肿瘤细胞置于一定位置,琼脂中肿瘤细胞可能向周围作全方位的移动,因此可以用来检测肿瘤细胞的主动移动能力。肿瘤细胞在适宜培养基中又可以增殖,从而可以测定肿瘤细胞克隆形成率。造血系统软琼脂集落形成试验方法相同,主要用于有关细胞分化的研究,但使用培养基不同。 (1)同上(1)~(3)步骤。 (2)调整细胞悬液密度为1×103个/ml细胞。 (3)制备底层琼脂,完全溶化的5%琼脂和 37℃ 左右预温的新鲜完全培养液以1:9比例在 40℃ 均匀混合,加入
ELISA。 2、首先初筛出能分泌与预定抗原起反应的McAb杂交瘤细胞,再进一步从中筛选出有预定特异性的杂交瘤细胞,然后选出可供实际应用,具有能稳定生长和有功能特性的细胞克隆。而且应尽量多选数株细胞,以保证有足够的候选株供实际应用。 3、克隆化技术 为了防止无关克隆的过度生长,对阳性孔需进一步克隆化。常用的克隆方法有:有限稀释法、软琼脂法、直接挑取法及荧光激活细胞分离仪(FACS)分离法。以前两种方法最为常用。 (1) 有限稀释法:将需要再克隆的细胞株自培养孔内吸出并作细胞
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