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- hz-H5577c
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
1000
- 供应商：
上海沪震
- 检测范围：
科研
- 应用：
酶联免疫
- 样本：
血清/血浆/组织/尿液
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人XBP1抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的人XBP1与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人XBP1抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人XBP1抗体与结合在包被抗体上的人XBP1结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，人XBP1浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中人XBP1的浓度。
人X-框结合蛋白1(XBP1)酶联免疫吸附测定试剂盒
| 英文名称 | Human XBP1(X-Box Binding Protein 1)ELISA Kit | ||
| 中文名称 | 人X-框结合蛋白1(XBP1)酶联免疫吸附测定试剂盒 | ||
| 货号 | 种属 | Human/人 | |
| 规格 | 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips) | ||
| 检测方法 | 双抗体夹心法 | ||
| 检测范围 | 78.125~5000pg/mL | 灵敏度 | 46.875pg/mL |
人X-框结合蛋白1(XBP1)酶联免疫吸附测定试剂盒1. 在各孔中加入标准品或样品各100μL， 37℃孵育90分钟
2. 加入100μL 生物素化抗体工作液，37℃孵育60分钟
3. 洗涤3次
4. 加入100μL酶结合物工作液， 37℃孵育30分钟
5. 洗涤5次
6. 加入90μL底物溶液， 37℃孵育15分钟左右
7. 加入50μL终止液，立即在450nm波长处测量OD值
8. 结果计算
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文献和实验发现，分子信标产生的荧光。所产生的荧光强度较分子信标与核酸结合时产生的荧光强度小，但其强度远远大于分子信标与核酸发生错配时产生的荧光强度。同时他们还发现分子信标不能与双链结合蛋白结合，产生荧光。 Nobuko Hamaguchi根据分子信标的原理设计了Aptamer信标，可以直接用来检测蛋白质。这一方法与传统的酶联免疫吸附法测定蛋白质相比，具有简单、灵敏等优点。但这一方法不能用于检测非特异性ssDNA结合蛋白，而且分子信标的构象受金属离子影响很大，一些金属离子的存在会干扰荧光信号的观测
过滤孔，导致膜的寿命减短，分离效率较低。同时，外泌体会粘附在膜上，导致产量降低。 免疫磁珠法：用包被抗标记物抗体的磁珠与外泌体囊泡孵育后结合，即可将外泌体吸附并分离出来。该方法分离得到的外泌体的生物活性易受 pH 和盐浓度影响，不利于下游实验。 试剂盒分离法：目前商业化的外泌体提取试剂盒多种多样，提取效果良莠不齐。同时试剂盒本身的价格比较高，且外泌体的得率和纯度一般，不是性价比高的一种分离方法。此方法得到的外泌体对于后续的鉴定实验、细胞实验和动物实验等可能有影响。 五、如何鉴定外泌
标的茎环结构被破坏，荧光分子与猝灭分子分开，荧光恢复。通过改变Aptamer信标的组成或茎杆区的长度，Aptamer信标可以用于不同种蛋白质的测定。与酶联免疫吸附测定蛋白质相比，Aptamer信标技术具有简单、直接、灵敏、省时等优点。人们还可以将多种Aptamer信标固定在芯片上，用于单一蛋白质的检测和分析。Aptamer信标技术的缺点是不能用于检测非特异性ssDNA结合蛋白，而且信标的构象受金属离子影响很大，一些金属离子的存在会干扰荧光信号的观测，特殊的发夹结构使分子信标具有很强的特异性识别靶标序列
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