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- 2025年07月15日
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1
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上海信裕
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Recombinant Treponema pallidum p41 Mosaic梅毒密螺旋体
1.当细胞铺满整个平皿(100mm)后,吸弃旧培养液，10mLPBS洗一遍
2.0.25%胰酶（预热20分钟左右）2ml消化，轻轻摇晃，Recombinant Treponema pallidum p41 Mosaic梅毒密螺旋体直至肉眼见单层细胞呈块状脱落（或在显微镜下观察细胞之间分离），立刻加5ml(DMEM+10%FBS)终止消化，轻柔吹打8-10次成单细胞。
3.离心1000rpm*5min,弃上清，加DMEM+10%FBS轻柔吹打。
4.将细胞悬液1:4传到100mm细胞培养皿中，每个皿加10ml(DMEM+10%FBS)培养液，正常情况下2-3天就可以长满，期间不用换液。
Recombinant Treponema pallidum p41 Mosaic梅毒密螺旋体的传代方法：首先在倒置显微镜下观察生长融合达80%，不需要长满，就准备传代。倒掉旧的培养基，再用已经高压灭菌过的PBS洗1－2次，我用的是25平方厘米的培养瓶，加入1毫升已经配制好的0.25%胰蛋白酶－0.02%EDTA(0.25%胰蛋白酶是用D-Hanks配制后先用滤纸过滤，再用一次性过滤器过滤除菌，Recombinant Treponema pallidum p41 Mosaic梅毒密螺旋体再分装成1ml的小包装，刚好每次用完一个，避免每次反复冻存，会使胰酶的活性下降），加入的量以刚好盖满瓶底为宜。放到倒置显微镜下观察变化，一旦发现细胞开始变园收缩，大约1－3分钟时间，必要时可以吹打帮助细胞分散，就立即加入培养基中和胰酶，如有EDTA最好要离心（800rpm,5min)，弃上清夜，Recombinant Treponema pallidum p41 Mosaic梅毒密螺旋体再加入完全培养基吹匀，再分瓶，一般一瓶可以分2－3瓶。放入5%的CO2培养箱，37度培养24小时后观察。
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文献和实验郑和平 广东省皮肤性病防治中心 ¨病原学 ¨梅毒螺旋体致病机理与梅毒的自然病程 ¨实验室诊断方法及其应用 ¨先天梅毒的实验室诊断方法及应用 ¨神经梅毒的实验室诊断方法及应用 一，梅毒病原学 ¨螺旋体： ¨原核细胞微生物特征。 ¨广泛存在。 ¨分为5个属：其中3个属有致病性。 1.致病性螺旋体 ¨梅毒病原体： Treponema pallidum subspecies pallidum ¨特征：形态：纤细
梅毒螺旋体（Treponema pallidum, TP）抗体的检测是评估TP感染的有效手段，对TP抗体的测试应该包括抗体筛查实验和对有重复反应性标本更特异的确认实验。根据《梅毒检测技术规范》要求，为了提高梅毒检测准确性，对于初筛阳性的结果，应选用不同厂家或不同方法的产品做重复试验，以提高梅毒检测的准确率。 对于TP抗体血清学检测的方法有非特异抗体检测方法、特异抗体检测方法，包含免疫印迹和FTA-ABS产品等。血清学实验室检测 梅毒螺旋体血清学检测常见方法学包括非特异性抗体
属中的其他非梅毒(苍白)螺旋体物种有关。人体内存在一些不致病或可能参与齿龈类、牙周病、腹泻等发病的与人类共生的螺旋体含有某些与TP相同的抗原决定簇, 可使宿主产生抗TP某些抗原组分的抗体, 经典的程序是检测前须增加一前处理步骤, 即用非致病性密螺旋体(treponema phagedenis)的Reiter株提取物吸收血清中可能存在的与其他非梅毒螺旋体抗原产生交叉反应的抗群、抗属或抗科抗体, 而目前市售试剂均省略了该过程, 从而增加了假阳性的概率; 在使用基因工程方法制备的重组多肽抗原代替以往使用
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