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- 2025年07月15日
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上海信裕
1.当细胞铺满整个平皿(100mm)后,吸弃旧培养液，10mLPBS洗一遍
2.0.25%胰酶（预热20分钟左右）2ml消化，轻轻摇晃，Cell Proliferation Kit I (MTT)直至肉眼见单层细胞呈块状脱落（或在显微镜下观察细胞之间分离），立刻加5ml(DMEM+10%FBS)终止消化，轻柔吹打8-10次成单细胞。
3.离心1000rpm*5min,弃上清，加DMEM+10%FBS轻柔吹打。
4.将细胞悬液1:4传到100mm细胞培养皿中，每个皿加10ml(DMEM+10%FBS)培养液，正常情况下2-3天就可以长满，期间不用换液。
Cell Proliferation Kit I (MTT)的传代方法：首先在倒置显微镜下观察生长融合达80%，不需要长满，就准备传代。倒掉旧的培养基，再用已经高压灭菌过的PBS洗1－2次，我用的是25平方厘米的培养瓶，加入1毫升已经配制好的0.25%胰蛋白酶－0.02%EDTA(0.25%胰蛋白酶是用D-Hanks配制后先用滤纸过滤，再用一次性过滤器过滤除菌，Cell Proliferation Kit I (MTT)再分装成1ml的小包装，刚好每次用完一个，避免每次反复冻存，会使胰酶的活性下降），加入的量以刚好盖满瓶底为宜。放到倒置显微镜下观察变化，一旦发现细胞开始变园收缩，大约1－3分钟时间，必要时可以吹打帮助细胞分散，就立即加入培养基中和胰酶，如有EDTA最好要离心（800rpm,5min)，弃上清夜，Cell Proliferation Kit I (MTT)再加入完全培养基吹匀，再分瓶，一般一瓶可以分2－3瓶。放入5%的CO2培养箱，37度培养24小时后观察。
xy-11372. hFOB 1.19（人SV40转染成骨细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy-1777. HIT-T15（仓鼠beta胰岛细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy-11506. Beta-TC-6（小鼠胰腺癌beta细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
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xy-2196. GC-2spd(ts)（小鼠精母细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy-249. NCL-H548（人胰腺癌细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy-138. Hs 683（人脑视神经胶质瘤细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy-7002. Hs 1.Tes（正常人睾丸细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy-7131. Hs 181.Tes（正常人睾丸细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
24858 Y567 [VTT C-79094]. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
24683 [X464-20C]. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
26292 NCYC 234 [IPAZSC 148]. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
26785 Y-99. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
55669 STJ.EPI.H7. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
15834 [CIP 104786]. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
11325 [CIP 104328; IAM 13570; ICMP 5794; NCPPB 2991]. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
25818 ICPB TR7 [C-1; ICMP 8639; NCPPB 2626]. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
43056 R1000. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
43057 A4. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
31798 MSU-1. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
31799 MSU-2. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
22064 NRRL 2543 [LSHTM BB325]. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
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文献和实验MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide] assay, first described by Mosmann in 1983, is based on the ability of a mitochondrial dehydrogenase enzyme from viable cells to cleave the tetrazolium rings of the pale yellow MTT
The MTT Cell Proliferation Assay
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