Apo-ONE Homogeneous Caspase-3/

Apo-ONE Homogeneous Caspase-3/7 Buffer计数：培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好，Apo-ONE Homogeneous Caspase-3/7 Buffer所以要进行细胞计数，计数结果以每毫升细胞数表示，细胞计数的原理和方法怀与血细胞计数相同，血细胞计数器；手工计数细胞，COUI TER计数仪；人工计数。


1.当细胞铺满整个平皿(100mm)后,吸弃旧培养液，10mLPBS洗一遍
2.0.25%胰酶（预热20分钟左右）2ml消化，轻轻摇晃，Apo-ONE Homogeneous Caspase-3/7 Buffer直至肉眼见单层细胞呈块状脱落（或在显微镜下观察细胞之间分离），立刻加5ml(DMEM+10%FBS)终止消化，轻柔吹打8-10次成单细胞。
3.离心1000rpm*5min,弃上清，加DMEM+10%FBS轻柔吹打。
4.将细胞悬液1:4传到100mm细胞培养皿中，每个皿加10ml(DMEM+10%FBS)培养液，正常情况下2-3天就可以长满，期间不用换液。
Apo-ONE Homogeneous Caspase-3/7 Buffer的传代方法：首先在倒置显微镜下观察生长融合达80%，不需要长满，就准备传代。倒掉旧的培养基，再用已经高压灭菌过的PBS洗1－2次，我用的是25平方厘米的培养瓶，加入1毫升已经配制好的0.25%胰蛋白酶－0.02%EDTA(0.25%胰蛋白酶是用D-Hanks配制后先用滤纸过滤，再用一次性过滤器过滤除菌，Apo-ONE Homogeneous Caspase-3/7 Buffer再分装成1ml的小包装，刚好每次用完一个，避免每次反复冻存，会使胰酶的活性下降），加入的量以刚好盖满瓶底为宜。放到倒置显微镜下观察变化，一旦发现细胞开始变园收缩，大约1－3分钟时间，必要时可以吹打帮助细胞分散，就立即加入培养基中和胰酶，如有EDTA最好要离心（800rpm,5min)，弃上清夜，Apo-ONE Homogeneous Caspase-3/7 Buffer再加入完全培养基吹匀，再分瓶，一般一瓶可以分2－3瓶。放入5%的CO2培养箱，37度培养24小时后观察。
xy1573 StemCryo 人胚胎干细胞冻存液 Human Pluripotent Stem Cell Cryopreservation Medium, 5 x 10mL
xy1574 TB 台盼蓝 Trypan Blue, 0.4% 50 ml
xy1575 DPBS 磷酸盐缓冲液 Dulbecco’s Phosphate-Buffered Saline 500 ml
xy1576 HBSS 平衡盐溶液 Hank's Balanced Salt Solution 500 ml
xy1577 PLL 多聚赖氨酸 Poly-L-Lysine 1 mg/ml 1 ml
xy1578 PLL 多聚赖氨酸 Poly-L-Lysine 10 mg/ml 1 ml
xy1579 GSN 0.2％的明胶溶液 0.2% Gelatin Solution 100ml
xy1580 FBS 胎牛血清 Fetal Bovine Serum, Human Cell Tested 500 ml
xy1581 P/S 青霉素/链霉素溶液 Penicillin/Streptomycin Solution 5 ml
xy1582 P/S 青霉素/链霉素溶液 Penicillin/Streptomycin Solution 100 ml
xy1583 AMS 抗真菌溶液 Antimycotic Solution 50 ml
xy1584 ABAMS 抗菌/抗霉菌溶液 Antibiotic/Antimycotic Solution 50 ml
xy1585 CCGW 细胞培养超纯水 Cell Culture Grade Water 500 ml
xy1586 MDS 肌细胞分离液 Myocyte Detachment Solution 100 ml
xy1587 BPE 牛脑垂体提取物 Bovine Pituitary Extract 25 mg
xy1588 BPE 牛脑垂体提取物 Bovine Pituitary Extract 100 mg
xy1589 ITS 胰岛素铁硒传递蛋白 Insulin-Transferrin-Selenium, 100x 10 ml
xy1590 L-Glu 左旋谷氨酰胺溶液 L-Glutamine Solution, 200 mM 100 ml
xy1591 NEAA 100X非必需氨基酸 100X Non-Essential Amino Acids 100ml
xy1592 HGL PCR 人胚层检测试剂盒 Human Germ Layer Detection Kit 50 reactions
xy1593 Ored 油红O染色试剂盒 Oil Red O Staining Kit 100 ml
xy1594 StemDS 人胚胎干细胞分离液 StemDS. Human Embryonic Stem Cell Dissociation Solution 100 ml
xy1595 BPF 牛血浆纤维粘连蛋白 Bovine Plasma Fibronectin 1 mg
xy1596 HCF 人细胞纤连蛋白 Human Cellular Fibronectin 100 μg
xy1597 BPV 牛血浆玻连蛋白 Bovine Plasma Vitronectin 100 μg
xy1598 rHSA 重组人血清白蛋白 "Recombinant Human Serum Albumin
" 1g
10g
50g
100g
xy1602 其他细胞外基质
xy1603 BPF 牛血浆纤维粘连蛋白 Bovine Plasma Fibronectin 1 mg
xy1604 CCCSCK 胶原I-细胞培养表面包被试剂盒 Collage I-Cell Culture Surface Coating Kit 10 mg
xy1605 PLL 多聚赖氨酸 Poly-L-Lysine 1 mg/ml 1 ml