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上海钰博
主要成分:含3151 mg/L D-葡萄糖,55mg/L丙酮酸钠,365mg/L L-谷氨酰胺,2438mg/L碳酸氢钠,8.1mg/L酚红,100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素。pH值7.1-7.4。
保存条件:2℃~8℃,避光
使用说明:用于细胞培养,不用于诊断和治疗。
配制每升培养基,DMEM/F12(不含HEPES)应该在950 ml去液态lb培养基离子水中加入: 胰化蛋白胨10g 酵母提取物 5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解。DMEM/F12(不含HEPES)用5mol/LNaOH调pH至7.0。用去离子水定容至1L。在15psi高压下蒸汽灭菌20min。
DMEM/F12(不含HEPES)1、LB固体培养基1L和液体一样,加15g琼脂粉,一定要在温度降下之前加好抗固态LB培养基生素,并且倒好板。 LB固体培养基倒板 1。配制:100mlLB培养基加入1.5g琼脂粉
DMEM/F12(不含HEPES)2、抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀。
DMEM/F12(不含HEPES)3、倒板:一般10ml倒1个板子。培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟。
DMEM/F12(不含HEPES)4、保存:用封口胶封边,并倒置放于4℃保存,一个月内使用。 配400ml的话成分按比例减少就行了,pH还是要按规定的。
PA12 小鼠成纤维细胞
RTE 大鼠气管上皮细胞
SF9 昆虫卵巢细胞
SMC 兔主动脉平滑肌细胞
Vero 猴肾细胞
WEHI-3 小鼠血液细胞
Y2 小鼠成纤维细胞
L6 大鼠骨骼肌成肌细胞
NRK 小鼠结缔组织细胞
AtT-20 小鼠垂体瘤
BC3H1, 鼠脑瘤
BV-2 小鼠小胶质瘤细胞
C6 大鼠脑胶质瘤
Cyc-tAg 小鼠T淋巴细胞瘤(SV40T抗原转染)
EL-4 鼠T淋巴细胞瘤
FOX-NY 小鼠淋巴瘤细胞
GH3 大鼠垂体瘤细胞
GT1.1 小鼠垂体瘤细胞(分泌促生长激素分泌激素)
HEPA1-6 小鼠肝癌细胞
MEL 小鼠红白血病细胞
MFC 小鼠前胃癌细胞
MMQ 大鼠垂体瘤细胞
NG108-15 小鼠神经细胞瘤/大鼠神经胶质细胞瘤杂交瘤细胞
P19 小鼠畸胎瘤细胞
PC-12 大鼠嗜铬细胞瘤细胞
RAW264.7 小鼠巨噬细胞瘤
SP2/0-AG14 小鼠骨髓瘤
Yac-1 小鼠淋巴瘤细胞
H-4-II-E 大鼠肝细胞瘤
L1210 小鼠淋巴细胞白血病
按照培养基的成分来分 培养基按其所含成分,DMEM/F12(不含HEPES)可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。DMEM/F12(不含HEPES)按照培养基的物理状态分 培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。DMEM/F12(不含HEPES)按照微生物的种类分 培养基按微生物的种类可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养基等四类DMEM/F12(不含HEPES).按照培养基用途分 培养基按其特殊用途可分为加富培养基、选择性培养基和鉴别培养基 。
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文献和实验色。HEPES有些昂贵,在高浓度时对一些细胞可能有毒。 原则上,HEPES作为缓冲剂可用来代替碳酸氢盐,以解除需要高浓度CO2培养环境的限制。实际操作中并非如此简单。溶解的CO2与碳酸氢盐对良好的细胞生长也是很重要的。HEPES使用方法有两种:(1)HEPES可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中,再过滤除菌。每1000ml培养液中加入2.38克HEPES,待溶后用lN NaOH 调pH至7.2,滤过除菌后使用。此时HEPES的使用浓度为10 mmol/L。(2)亦可配成 100 x 贮存液(l mol/L
液中加入2.38克HEPES,待溶后用lN NaOH 调pH至7.2,滤过除菌后使用.此时HEPES的使用浓度为10 mmol/L. (2)亦可配成 100 x 贮存液(l mol/L),使用前取 99ml培养液加入 lml贮存液,最终应用浓度仍为10mmol/L。l mol/L(100 x)HEPES贮存液配制方法:取23.8g HEPES溶于90ml双蒸水中,用lN NaOH调pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,过滤除菌,分装小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存.
液中加入2.38克HEPES,待溶后用lN NaOH 调pH至7.2,滤过除菌后使用.此时HEPES的使用浓度为10 mmol/L. (2)亦可配成 100 x 贮存液(l mol/L),使用前取 99ml培养液加入 lml贮存液,最终应用浓度仍为10mmol/L。l mol/L(100 x)HEPES贮存液配制方法:取23.8g HEPES溶于90ml双蒸水中,用lN NaOH调pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,过滤除菌,分装小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存.
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