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上海钰博
大鼠脑微血管内皮细胞完全培养基中已包含了高质量的血清和大鼠脑微血管内皮细胞所需生长因子,可直接用于大鼠脑微血管内皮细胞的培养。
注意事项:
1. 培养基为低温长途运输,收到后请先查看是否有漏液、破损或污染等,若出现问题请及时和我们联系。
2. 用75%的酒精擦拭瓶身,4℃保存。
A、 大鼠脑微血管内皮细胞完全培养基划线获得单个菌落的方法。划不出单个菌落的原因:
(1) 平板上有过多的水分;
(2) 划线时接种环未经反复灼烧。
(3) 多区划线,三区或四区划线。
B、 大鼠脑微血管内皮细胞完全培养基涂布和倾注的区别:
涂布利于观察,但由于涂布棒上会带有少量的菌液,影响计数的准确性。
涂布更为准确,但不利于观察菌落的状态。
C、 大鼠脑微血管内皮细胞完全培养基培养基配制时应注意的问题:
(1)灭菌温度要严格控制,按照要求灭菌,尤其含糖量较高的培养基温度不应太高,过高会导致糖分焦化,影响质量。
(2)琼脂培养基不能反复溶化。反复溶化会破坏培养基中的营养成分。
(3)培养基不能反复灭菌,反复灭菌也会导致营养成分的破坏。
(4)含琼脂的培养基灭菌后,要摇匀。
D、 大鼠脑微血管内皮细胞完全培养基平板的保存:大多数平板如VRBA、DC、、尿素酶生化管、显色系列等要避光低温保存。
E、 大鼠脑微血管内皮细胞完全培养基产品的保存:
(1) 干粉培养基:避光干燥,结块后不能使用。
(2) 亚碲酸钾卵黄增菌液、50%卵黄乳液等:冷冻保存,使用时,要常温解冻,避免水浴加热。
(3) 抗生素类:冷藏保存,温度过高会导致灵敏度的下降。
(4) 兔血浆:冷藏保存少量的红色不会影响结果。
F、大鼠脑微血管内皮细胞完全培养基观察时间的掌握:按SN、GB等标准或培养基的使用说明所述时间进行观察,时间过短或时间过长,单菌落的特征都不会很明显。如单增李斯特氏菌显色培养基,时间短单菌落看不到卵磷脂环,时间长绵羊李氏菌也会产生沉淀环。OXA、PALCAM的观察也如此,时间过长,李氏菌使整个平板成黑色,不利于观察单个菌落。
yb-1252 SRSV/3T3(SRSV转化的3T3细胞)
yb-1253 3T6-Swiss albino(胚胎成纤维细胞)
yb-1254 PA317(成纤维细胞)
yb-1255 3T3-Swiss albino(胚胎成纤维细胞)
yb-1256 Mo-MuLv/3T3(Mo-MuLv感染的3T3细胞)
yb-1257 MRC-5(胚肺细胞)
yb-1258 WI-38(胚肺细胞)
yb-1259 FRhK-4(恒河猴胚肾细胞)
yb-1260 VERO C1008 (E6)(非洲绿猴肾细胞)
yb-1261 Pt K1 (NBL-3)(长鼻袋鼠肾细胞)
yb-1262 L1210(白血病细胞)
yb-1263 Neuro-2A(脑神经瘤细胞)
yb-1264 PC-12(肾上腺嗜铬细胞瘤细胞)
yb-1265 HeLa(宫颈癌细胞)
yb-1266 A549 [A-549](肺癌细胞)
yb-1267 MCF7(乳腺癌细胞)
yb-1268 Hep 3B2.1-7(肝癌细胞)
yb-1269 MDA-MB-231(乳腺癌细胞)
yb-1270 Hep G2(肝癌细胞)
yb-1271 HCT 116(结肠癌细胞)
yb-1272 22RV1(前列腺癌细胞)
yb-1273 HT-29(结肠癌细胞)
yb-1274 KG-1(白血病细胞)
yb-1275 LoVo(结肠癌细胞)
yb-1276 THP-1(单核细胞白血病)
yb-1277 SW620(结肠癌细胞)
yb-1278 SK-N-SH(神经母细胞瘤细胞)
yb-1279 SH-SY5Y(神经母细胞瘤细胞)
yb-1280 COLO 205(结肠癌细胞)
yb-1281 T/G HA-VSMC(人主动脉血管平滑肌细胞)
yb-1282 HUVEC(人脐静脉血管内皮细胞)
yb-1283 A10(大鼠主动脉血管平滑肌细胞)
yb-1284 3T3-L1(小鼠脂肪细胞)
yb-1285 A9(皮下结缔组织细胞)
yb-1286 WEHI 22.1(B淋巴细胞 )
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文献和实验体外培养模型已被广泛应用于血脑屏障的研究、脑血管疾病的病理生理及分子生物学研究、新药筛选、脑微血管内皮细胞生理生化及药理学研究等领域。而大多数体内实验采用大鼠为动物模型,而且大鼠具有较多的细胞生物学研究所需的抗体可用,因此进行大鼠脑微血管内皮细胞的培养具有重要的意义。自从Panula等[2]首次成功培养大鼠脑微血管内皮细胞以来,国内外有关大鼠脑微血管内皮细胞的分离和培养方法已有较多的报道,我们发现国内的方法多以组织匀浆、两次尼龙网过滤分离脑微血管段为主[3,4],也有采用酶消化、梯度离心及尼龙网过滤
【摘 要】目的:培养脑皮质微血管内皮细胞。方法:取1~5d Wistar乳鼠脑皮质,经不同孔径的筛网过滤后,用胶原酶振荡消化获得的微血管内皮细胞进行培养,用Ⅷ因子相关抗原免疫组化鉴定。结果:培养的细胞呈单层贴壁生长,7~9d呈典型的铺路卵石样征象。结论:建立了一种简便易行的培养脑皮质微血管内皮细胞的方法。【关键词】 细胞培养;微血管内皮细胞;Wistar大鼠脑微血管内皮细胞是构成血脑屏障的主要成分,具有特殊的形态结构和机能,在许多病理状态下起重要作用[1]。建立脑微血管内皮细胞体外培养,可获
V asc B iol, 1995, 15 (7) : 903~ 909. [ 3 ] 钱志远, 黄 强, 周丽英, 等. 鼠脑微血管内皮细胞的分离与长期培养[J ]. 细胞生物学杂志, 1999, 21 (1) : 42~ 45. [ 4 ] 王建民, 施永德, 步燕芳, 等. 大鼠脑血管内皮细胞的分离培养与形态学观察[J ]. 解剖学杂志, 1998, 21 (6) : 495~ 499. [ 5 ] 刘鼎新, 吕证宝. 细胞生物学研究方法与技术[M ]. 北京: 北京医科大学, 中国
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