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上海钰博
人脂肪细胞完全培养基中已包含了高质量的血清和人脂肪细胞所需生长因子,可直接用于人脂肪细胞的培养。
注意事项:
1. 培养基为低温长途运输,收到后请先查看是否有漏液、破损或污染等,若出现问题请及时和我们联系。
2. 用75%的酒精擦拭瓶身,4℃保存。
A、 人脂肪细胞完全培养基划线获得单个菌落的方法。划不出单个菌落的原因:
(1) 平板上有过多的水分;
(2) 划线时接种环未经反复灼烧。
(3) 多区划线,三区或四区划线。
B、 人脂肪细胞完全培养基涂布和倾注的区别:
涂布利于观察,但由于涂布棒上会带有少量的菌液,影响计数的准确性。
涂布更为准确,但不利于观察菌落的状态。
C、 人脂肪细胞完全培养基培养基配制时应注意的问题:
(1)灭菌温度要严格控制,按照要求灭菌,尤其含糖量较高的培养基温度不应太高,过高会导致糖分焦化,影响质量。
(2)琼脂培养基不能反复溶化。反复溶化会破坏培养基中的营养成分。
(3)培养基不能反复灭菌,反复灭菌也会导致营养成分的破坏。
(4)含琼脂的培养基灭菌后,要摇匀。
D、 人脂肪细胞完全培养基平板的保存:大多数平板如VRBA、DC、、尿素酶生化管、显色系列等要避光低温保存。
E、 人脂肪细胞完全培养基产品的保存:
(1) 干粉培养基:避光干燥,结块后不能使用。
(2) 亚碲酸钾卵黄增菌液、50%卵黄乳液等:冷冻保存,使用时,要常温解冻,避免水浴加热。
(3) 抗生素类:冷藏保存,温度过高会导致灵敏度的下降。
(4) 兔血浆:冷藏保存少量的红色不会影响结果。
F、人脂肪细胞完全培养基观察时间的掌握:按SN、GB等标准或培养基的使用说明所述时间进行观察,时间过短或时间过长,单菌落的特征都不会很明显。如单增李斯特氏菌显色培养基,时间短单菌落看不到卵磷脂环,时间长绵羊李氏菌也会产生沉淀环。OXA、PALCAM的观察也如此,时间过长,李氏菌使整个平板成黑色,不利于观察单个菌落。
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文献和实验指培养细胞时,具备可使其最大限度地生长和繁殖的条件,而含有满足各种营养缺陷突变型要求的培养基。其组成可按生物种类和目的而异,但一般是由酵母浸膏、麦芽汁、牛肉膏、蛋白胨、胰蛋白胨、酪蛋白氨基酸等营养物中选几种营养物配合而成。完全培养基用于短期内无性增殖大量细胞,以及分离和增殖营养缺陷突变型。
“完全培养基” 指的是已经添加了各种添加物、含有培养基的所有成分、能够满足某种特定细胞生长所需的培养基。通常是使用限定成分的培养基来配置,一些不稳定的成分——如谷氨酰胺以及各种补充物、血清、生长因子或激素,都在临用前加入。 限定成分的培养基品种繁多,从简单的仅含有必需氨基酸、维生素、无机盐的 Eagle's MEM,到复杂的 M199、F12 等,这些都可被用作一种基础培养基,添加各种不同的特殊物质,以满足许多不同类型细胞的需求。
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