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上海笃玛生物科技有限公司
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体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等
48T/96T
规格: | 48T | 产品价格: | ¥800.0 |
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规格: | 96T | 产品价格: | ¥1680.0 |
大鼠E钙黏蛋白/上皮钙黏蛋白(E-Cad)ELISA试剂盒
大鼠E钙黏蛋白/上皮钙黏蛋白(E-Cad)ELISA试剂盒
适用的样本类型
血清、血浆、细胞上清液、胸腹水、脑脊液、处理后的固体样本等重复性:板内、板间变异系数均小于 15%
大鼠E钙黏蛋白/上皮钙黏蛋白(E-Cad)ELISA试剂盒
大鼠E钙黏蛋白/上皮钙黏蛋白(E-Cad)ELISA试剂盒
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被相关指标的抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并 洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的相关指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解 冻并确保样品均匀地充分解冻。
猪尿激酶型纤溶酶原激活因子(PLAU/uPA)酶联免疫试剂盒
大鼠E钙黏蛋白/上皮钙黏蛋白(E-Cad)ELISA试剂盒
8. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
大鼠E钙黏蛋白/上皮钙黏蛋白(E-Cad)ELISA试剂盒
洗板方法
1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置 1min 后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板 5次。大鼠E钙黏蛋白/上皮钙黏蛋白(E-Cad)ELISA试剂盒
操作步骤
1.从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃。aatbio | 2018 美国 加利福尼亚州反应荧光探针和发光探针,生物素和端粒酶 |
beyotime(碧云天) | 2020年中国上海碧云天生物技术有限公司主要研发生产生物、用试剂、试剂盒、消耗品和仪器设备,同时提供生命科学研究的技术服务和一站式实验仪器设备采购平台 |
neobiolab/neoscientific | neobiolab/neoscientific拥有大量高度敏感的 ELISA 试剂盒,以及现成的蛋白质、肽、抗体和细胞培养产品。 |
APExBIo | 2018美国德克萨斯州 APExBIO 专注小分子抑制剂、激动剂、拮抗剂及化合物库! |
opmbiosciences | 奥浦迈生物致力于细胞培养技术开发和生物制药委托开发生产服务 |
GraceBio | 2018美国俄勒冈州 硅胶压封试剂围栏 |
ibgrl | 2019 英国 蛋白质开发和生产部门(PDPU)是国际血型参考实验室(IBGRL)和布里斯托尔输血科学研究所(BITS)的一部分。该部门与蛋白质工程组(BITS)合作,在NHS血液和移植(NHSBT)中发挥重要作用。 |
genloci | 吉锐生物是一家从事多肽、抗体与基因 技术等创新药物的研发、生产与销售的高新技术生物企业 |
bioer | 2020年中国杭州博日 分子生物学试剂 |
cusabio | CUSABIO是一家集研发、生产、销售于一体的国家高新技术企业。致力于为 、细胞生物学、免疫学、神经科学、表观遗传学等研究领域的客户提供 的抗体、蛋白质以及ELISA 试剂盒。 |
servicebio | 赛维尔 拥有强大的科研和服务实力,包括抗体研发中心,超微病理学中心,病理检测中心,SPF实验动物中心和其他技术平台。我们进行独立研发,以优化各种实验方法和过程。同时,开发各种试剂和消耗品。 |
bio-quality | 科佰迪基于定量PCR、等温扩增PCR(LAMP、RPA)、一代测序、二代测序、数字PCR等多种分子检测平台进行产品的开发。科佰迪专注于生物制品质量控制的关键技术和产品的开发(如:宿主细胞残留DNA检测试剂盒)以及基于等温扩增PCR(LAMP)的快速病原菌检测试剂盒的开发(如: 可视化2019-nCoV LAMP 核酸扩增试剂盒) |
bachem | 2018瑞士多肽及试剂盒 |
bioingentech | 智利生物公司,分子诊断试剂盒,PCR, 酶 |
bma | 2018BMA BIOMEDICALS是一家瑞士免疫试剂制造商,也是 研究人员免疫化学品的供应商。来自BMA的大多数单克隆抗体在体外产生而没有胎牛血清。 |
bigelow | 2018美国马萨诸塞州藻类细菌产品 |
ampliqon | 丹麦 分子生物学供应商商 分子酶 人造体液 PCR聚合酶 |
evercyte | evercyte专注于从不同组织中分离间充质干细胞,建立细胞外囊泡、重组囊泡的生产系统 |
kainos | 2018北爱尔兰Kaanos是一家生产临床试验药物的公司 只有cy-4000一个试剂盒 FGF23试剂盒 |
virusys | 2018 美国马里兰州 Virusys腺病毒六邻体抗原捕获ELISA试剂盒(AK290-2和AK290-5)是高灵敏度和特异性半定量分析,用于检测各种样品基质中的腺病毒六邻体抗原。为了增强ELISA试剂盒的分析效用,Virusys开发了腺病毒六邻体抗原校正试剂盒,该试剂盒可以生成六邻体抗原校准曲线并估计样品中的六邻体抗原浓度。 |
cytodiagnostics | 2018加拿大安大略省微球公司 磁珠 纳米金 纳米银 荧光纳米微球 羧基微球 聚苯乙烯微球 磁性微球 |
iqbiosciences | iqbiosciences用于研究和诊断的人和动物原代细胞 |
cellntec | 2018瑞士专业生产上皮细胞培养基及相关产品 |
JCRB | cellbank.nibiohn日本JCRB细胞库收集各种人类和动物培养细胞,包括和转基因细胞。 动物细胞,人细胞 细胞库,政府机构,非盈利机构 |
invitek-molecular | 2019德国invitek-molecular提供从样品采集,稳定和纯化开始的各种样品的手动和自动DNA和RNA提取产品。 |
aurorabiolabs | aurorabiolabs位于加利福尼亚州圣地亚哥的高科技园区。aurorabiolabs的使命是制造高质量的蛋白质样品,开发准确的分析方法,并为生命科学发现提供服务。 |
优势订购
优势供应:Sigma amresco(VWR) thermo millipore NEB
常备现货 常备现货:Trizol lip2000 lip3000 DMSO
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弗氏不完全佐剂 西班牙琼脂糖等等
AXYGEN常用耗材 各种规格袋子盒装吸头 离心管 PCR管 八排管
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标本的采集及保存
1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3.细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 (注:标本溶血会影响**检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。)
标本的稀释原则:首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。
标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为300 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。 如配制150 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
生物素标记抗体的稀释原则:临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
操作步骤
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。 为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。
5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
注意事项
1.用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。
2.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是加底物溶液及2N 。测量时先用此孔调OD值至零。
3.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
4.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。
5.建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
洗板方法
手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。
自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
计算
以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。
2.洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
3.一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。
5.如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请乘以稀释倍数。
6.在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。
7.底物请避光保存。
8.不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。
注意事项:收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4 ℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本, 将标本及时分装后放在-20 ℃或-70 ℃条件下保存。避免反复冻融。标本2 -8 ℃可保存48 小时,-20 ℃可保存1 个月。-70度可保存6 个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
试剂盒性能
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。
2.批内与批见应分别小于9%和15%