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上海笃玛生物科技有限公司
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血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等
48T/96T
规格: | 48T | 产品价格: | ¥1080.0 |
---|---|---|---|
规格: | 96T | 产品价格: | ¥1896.0 |
实验原理
1. 抗体或抗原的吸附:将待测抗原或抗体吸附到固相载体上,常用的载体有微孔板、玻璃纤维、聚苯乙烯等。这些载体表面具有特殊的化学基团,能够与待测抗原或抗体特异性结合。
2. 酶标记的抗体或抗原的结合:将酶标记的抗体或抗原与待测抗原或抗体结合,形成酶标记的抗原-抗体复合物。酶标记的抗体或抗原具有高度的特异性和亲和力,能够与待测抗原或抗体形成稳定的复合物。
3. 底物显色反应:当酶标记的抗原-抗体复合物与底物溶液接触时,酶能够催化底物分解,产生颜色变化。通过测量颜色的变化程度,可以判断待测抗原或抗体的浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解 冻并确保样品均匀地充分解冻。
注意事项
1. 实验前请仔细阅读本试剂盒的使用说明,确保所有材料、器具和试剂准备齐全。
2. 为保证实验结果的准确性,请务必遵循实验步骤进行操作,并注意控制实验条件的一致性。
3. 实验过程中请勿触摸酶标板上的酶标抗体区域,以免影响实验结果。
4. 实验结束后请及时清洗并整理实验器具,避免交叉污染。
5. 本试剂盒仅供体外诊断使用,使用前请仔细阅读说明书,如有疑问请及时联系厂家或专业技术人员。
实验步骤
1. 样品收集与处理
(1)根据需要收集不同种类的样品,如血清、血浆、尿液等。
(2)对于血清和血浆样品,将采集的血液静置一段时间后,离心分离出血清或血浆。
(3)对于尿液样品,收集尿液后,可直接进行检测。
2. 样品稀释
根据试剂盒说明,对需要稀释的样品进行适当比例的稀释。
3. 加样
(1)按照试剂盒说明,分别将标准品、质控品和待测样品加入相应的孔中。
(2)每孔加入50μL,轻轻震荡混匀。
4. 封闭
根据试剂盒说明,加入适量的封闭液,覆盖板孔,并轻轻震荡混匀。封闭液一般为含有一定浓度的非特异性结合配体的溶液,可以降低非特异性结合的影响。
5. 洗涤
(1)将板孔洗涤液加入到每个孔中,轻轻震荡,然后倒掉洗涤液。重复洗涤3次,每次用洗涤液充分洗涤
(2)最后一次洗涤后,用纸巾轻轻吸干板孔表面的水分。
6. 酶标二抗加入及孵育
(1)根据试剂盒说明,将酶标二抗加入相应的孔中。
(2)孵育一定时间后,将板孔中的溶液倒掉。
7. 洗涤与显色
(1)重复步骤5的洗涤过程。
(2)加入显色剂,孵育一定时间后,将板孔中的溶液倒掉。
8. 终止反应与读数
(1)加入终止液,终止酶促反应。
(2)用酶标仪在450nm波长处读取各孔的光密度值(OD值)。
结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
实验器材的使用方法
1、塞瓶口时消毒,右手拇指、食指塞进胶皮内,将塞旋入消毒瓶口内,瓶口再消毒
瓶直立火焰前方,双手拇指、中指固定瓶位,双手食指将胶皮外翻,后用消毒纸包装
2、吸管的使用:右手松夹筒盖,左手水平抖动管筒,管头端暴露时取管
筒口消毒套盖,吸管套吸头后,火焰上方来回3次待用
3、 瓶管、盖的使用要求同塞,需使用同一盖时
盖使用面放在酒精棉球上,套盖前,盖使用面火焰消毒
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