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土壤碱性磷酸酶活性检测试剂盒
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S-AKP/ALP
3个月
4度
1000
青岛捷世康生物科技有限公司
50T/48S
土壤碱性磷酸酶活性检测试剂盒注意:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。货号: H0490规格: 50T/48S产品说明: 土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷化合物矿化的酶,其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性,是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH显著影响。通常按照其最适pH范围,分为碱性、中性和酸性三种类型磷酸酶。碱性环境中,S-AKP/ALP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠,通过测定酚的生成量即可计算出S-AKP/ALP活性。产品内容:试剂一:液体 20mL×1 瓶,4℃避光保存。试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存。用前加 50mL 蒸馏水充分溶解。试剂三:液体 5mL×1 瓶,4℃保存。试剂四:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加 1152μL 无水乙醇(自备),48 μL 蒸馏水充分溶解。(变褐色后不能再使用)标准品:液体 1mL×1 支,0.5μmol/mL 苯酚标准液,4℃保存。土壤碱性磷酸酶活性检测试剂盒试验中所需的仪器和试剂:可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水、乙醇和甲苯(不允许快递)。操作步骤:催化反应:称取风干混匀土壤约0.1g,加入0.05mL甲苯(自备),轻摇15min;加0.4 mL试剂一并且摇匀后,置于37℃恒温培养箱,开始计时,催化反应24h;到时后迅速加入1mL试剂二充分混匀,以终止酶催化的反应。10000rpm室温离心10min,取上清液置于冰上待测。显色反应:1.分光光度计预热 30 min 以上,调节波长到 660 nm,蒸馏水调零。2.空白管:取 1mL 玻璃比色皿,加入 50 μL 蒸馏水,100 μL 试剂三,20 μL 试剂四,充分混匀,显色后再加蒸馏水 830 μL,混匀后室温静置 30 min,于 660 nm 测定吸光度,记为 A 空白管。3.标准管:取 1mL 玻璃比色皿,加入 50 μL 标准液,100 μL 试剂三,20 μL 试剂四,充分混匀,显色后再加蒸馏水 830 μL,混匀后室温静置 30 min,于 660 nm 测定吸光度,记为 A 标准管。4.测定管:取 1mL 玻璃比色皿,加入 50 μL 上清液,100 μL 试剂三,20 μL 试剂四,充分混匀,显色后再加蒸馏水 830 μL,混匀后室温静置 30 min,于 660 nm 测定吸光度,记为 A 测定管。S-ALP活性计算:活性单位定义:37℃中每克土壤每天释放 1μmol 酚。S-AKP/ALP(U/g 土样)=[C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)]×V 总÷W÷T = 0.725×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷WC 标准液:0.5μmol/L;V 总:催化体系总体积,1.45mL;W:土壤样品质量,g;T:催化反应时间,24 h=1 d。
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