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文献和实验Active Motif公司是一家致力于细胞生物学和分子生物学研究用试剂的开发和生产的专业公司,是世界上著名的转录因子试剂生产商。其细胞生物学产品涉及:蛋白质转染试剂、一氧化氮定量试剂盒、转录因子ELISA试剂盒、细胞核提取试剂盒、染色试剂、细胞提取物、抗体等;分子生物学产品涉及:mRNA和总RNA的提取、E.coli表达系统、蛋白纯化系统、基因快速富集系统、DNA分离纯化系统、cDNA合成、RT-PCR试剂盒以及其他辅助试剂。
最佳的银染灵敏度和最快的染色速度 SilverQuest™ Silver Staining Kit实验步骤专门设计,确保最快地得到结果的同时保证最好的银染灵敏度和清晰的背景。90分钟内就可以检测到0.3ng蛋白。 下面列出的样品在NuPAGE® Novex 4-12% Bis-Tris凝胶上分离,然后使用SilverQuest™ Sliver Staining Kit染色。箭头表明0.3ng蛋白。 Lanes 1,7:5 Lanes
性好;一抗的species reactivity中无检测组织的种属,这是比较常见的错误;一抗选择rat,而二抗是抗mouse/rabbit等均有可能出现阴性结果。 (2)抗体孵育时间过短,容易导致阴性结果。一般一抗我建议4度孵育过夜和37度复温45min;二抗我一般37度30min。我不喜欢参照二抗染色试剂盒说明书。 (3)抗体浓度过低。这是阴性结果的最可能原因。必须提高稀释度,我一般初次做一种新抗体,喜欢先用说明书建议的低浓度和高浓度做一次,然后决定是向高还是低方向摸索。一般先决定二抗
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