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- 2025年07月10日
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上海乔羽生物科技有限公司
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文献和实验50 3.97 3.39 3.05 2.83 2.67 2.56 2.46 2.38 2.32 2.22 2.11 1.99 1.87 1.72 1.54 50 60 3.92 3.34 3.01 2.79 2.63 2.51 2.41 2.33 2.27 2.17 2.06 1.94 1.81 1.67 1.48 60 80 3.86 3.28 2.95 2.73 2.57 2.45 2.35 2.28 2.21 2.11 2.00 1.88 1.75 1.60 1.40 80
1、变性温度和时间： 模板 DNA 和 PCR 产物的变性不充分是 PCR 失败的主要原因。适宜的变性条件是 95℃ 30s 或 97℃15s。变性不完全，DNA 双链会很快复性，因而减少产量。在变性中，温度太高或反应时间过长，会导致酶活性的损失。Taq DNA 聚合酶活性的半寿期：92.5℃为 2h 以上，95℃为 40min，97℃为 5min。 2、复性温度和时间： 复性温度决定 PCR 的特异性，而引物退火温度和所需时间长短取决于反应体系中的基本组成及扩增引物的长度和浓度，实际使用
； V 0 －原溶液的体积； S 1 －原溶液中有机溶剂的浓度 S 2 －要求达到的有机溶剂浓度； 100－指加入的有机溶剂浓度为100％。如所加入的有机溶剂的浓度为95％，上式(100一S2)项应改为(95一S2)。 在大规模制备沉淀时，若溶剂浓度的要求不太严格时，可用简单的交叉方法求出。 本实验采用有机溶剂沉淀法从肝匀桨中分离纯化碱性磷酸酶(简称AKP)。先用低浓度醋酸钠(低渗破模作用)制备肝匀浆。醋酸镁则有保护
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