Capan-1人胰腺癌细胞/STR鉴定

Capan-1人胰腺癌细胞 STR鉴定

细胞介绍

该细胞来源于一位40岁白人男性患者的肝转移。细胞表达粘液素，Rh+， HLA A2,，A9，B13，B17。含有刺激素受体和乙二醇激素受体。

细胞特性

1） 来源：胰腺癌，肝转移

2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长

3） 含量：>1x106 细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5) 用途：仅供科研使用。
Capan-1人胰腺癌细胞 STR鉴定

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备IMDM（推荐iCell-0008）培养基；优质胎牛血清，20%；双抗1%。

Capan-1 细胞ATCC官网有关细胞的说明：

Capan-1 cells typically recover very slowly from cryopreservation, and may need more than a week before the cells attach well and grow sufficiently to be subcultured. Unfortunately this is normal for this cell line. It is normal for cultures of Capan-1 to have many cells which remain in suspension, these cells are viable and should be retained by gentle centrifugation and added back to the adherent population (in the same flask). Do not separate the populations (or discard floating cells) because the culture will become too dilute. Patience is the key to culturing these cells. HTB-79 cells grow as adherent patches with an epithelial-like morphology. Cells on the edges of a patch are somewhat elongated, while cells in the center of the patch are cuboidal and small. Growth will be patchy initially and the cells are very small with epithelial-like morphology. Theese cultures only become 80-90% confluent and will begin to detach at that confluence. There are also normally empty spaces in the culture vessels.

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二．细胞处理：

1） 冻存细胞的复苏：

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

3.轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

 业务范围