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无
Capan1
细胞系
100万
细胞系
是
贴壁培养
长期
冻存/复苏
胰腺
是
上皮细胞样
否
正常组织
是
胰腺
100万
镜像绮点
1*10^6
Capan-1人胰腺癌细胞 STR鉴定
细胞介绍
该细胞来源于一位40岁白人男性患者的肝转移。细胞表达粘液素,Rh+, HLA A2,,A9,B13,B17。含有刺激素受体和乙二醇激素受体。
细胞特性
1) 来源:胰腺癌,肝转移
2) 形态:上皮细胞样,贴壁生长
3) 含量:>1x106 细胞数
4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途:仅供科研使用。
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。
Capan-1人胰腺癌细胞 STR鉴定
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备IMDM(推荐iCell-0008)培养基;优质胎牛血清,20%;双抗1%。
Capan-1 细胞ATCC官网有关细胞的说明:
Capan-1 cells typically recover very slowly from cryopreservation, and may need more than a week before the cells attach well and grow sufficiently to be subcultured. Unfortunately this is normal for this cell line. It is normal for cultures of Capan-1 to have many cells which remain in suspension, these cells are viable and should be retained by gentle centrifugation and added back to the adherent population (in the same flask). Do not separate the populations (or discard floating cells) because the culture will become too dilute. Patience is the key to culturing these cells. HTB-79 cells grow as adherent patches with an epithelial-like morphology. Cells on the edges of a patch are somewhat elongated, while cells in the center of the patch are cuboidal and small. Growth will be patchy initially and the cells are very small with epithelial-like morphology. Theese cultures only become 80-90% confluent and will begin to detach at that confluence. There are also normally empty spaces in the culture vessels.
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二.细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×106~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×106~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
注意事项
1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。
3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。
4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
主要产品和技术服务:
一、原代细胞服务
各类模式哺乳动物的多种原代细胞资源;
多种人源性正常及肿瘤原代细胞资源;
原代细胞分离和培养相关试剂、kit、培养基添加剂等;
原代细胞相关技术服务和整体实验外包服务;
二、细胞株/系服务
细胞株/系培养、增殖、冻存和相关说明书;
细胞系培养过程的技术指导;
细胞系培养基、添加剂、血清及相关生长因子、试剂等;
三、iPS细胞
iPS细胞基础培养(有滋养层or无滋养层在);
iPS细胞增殖及冷冻保存;
iPS基础培养技术实习;
新药及实验仪器上市前评估;
四、技术外包服务:各类细胞生物学实验、分子生物学实验、显微镜拍照服务等
五、其他:根据客户需要定制服务等
镜像绮点(上海)细胞技术有限公司(子公司赛百慷)( Cellverse Bioscience Technology Co., Ltd. )是一家专注于研发生产高品质原代细胞、细胞系、干细胞以及相关生物学试剂,并提供专业生物医学技术服务外包的高新技术企业,公司总部位于上海。
镜像绮点专注于研发生产高品质的人体组织源及动物组织源的原代细胞、细胞系、iPS细胞等产品,提供以及相关的CRO,CMO服务,同时也为客户提供相关培养体系,培养基等试剂。在中国,镜像绮点除与中国科学院细胞库合作外,还与各地医学学院、机构、药企合作,其中包括:上海交通大学医学院,复旦大学医学院。
目前,镜像绮点已经建立起国内先进完备的“人类组织源原代细胞库和细胞系库”两大细胞资源库,各种种属源细胞株(系)500多种,原代细胞包括人源、鼠源、兔源、猪源、羊源以及其它动物源近700多种,3000多株现货,引进了生命科学领域的全套实验设备,建立了先进的生产研发实验室,采用了国际先进的行业技术标准、制造工艺、质检流程,保证了产品出厂的品质,公司同时更注重产品售前与售后的技术服务,着重满足客户的需求与体验。还申请了相关细胞培养试剂等十几项专利产品。正是凭借独有的原代细胞领域原创技术的优势,镜像绮点(上海)细胞技术有限公司,已经成为国内外众多生物医药企业诚信的合作伙伴和坚强的技术后盾。
镜像绮点公司已及iCell镜像绮点人秉承着将细胞培养产业化的良好愿望,多年来一直致力于科研诚信服务,每一株细胞都饱含着赛百慷对于科研严谨的极度追求。
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