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上海笃玛生物科技有限公司
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血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等
48T/96T
规格: | 48T | 产品价格: | ¥1080.0 |
---|---|---|---|
规格: | 96T | 产品价格: | ¥1896.0 |
人组织蛋白酶抗体(Cath Ab)ELISA试剂盒
实验原理
酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种基于抗原抗体反应的免疫学检测方法。其基本原理是利用抗原抗体的特异性结合,通过酶对底物反应的显色反应,对样本中的待测物质进行定量或定性分析。ELISA方法具有灵敏度高、特异性强、操作简便、适用范围广等特点,因此在生物医学研究、临床诊断和食品安全检测等领域得到了广泛应用。
人组织蛋白酶抗体(Cath Ab)ELISA试剂盒
检测前准备工作:
1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。
2. 将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1:25)。未用完的放回4℃。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,可用40℃水浴微加热使结晶溶解后再配制洗涤液(加热温度不要超过50℃,使用时洗涤液应为室温)。当日使用。
3. 标准品: 于10000×g离心1分钟,加入标准品&样品稀释液1.0mL至冻干标准品中,旋紧管盖,静置10分钟,上下颠倒数次,待其充分溶解后,用移液器将其轻轻混匀(浓度为8000pg/mL)。然后根据需要进行倍比稀释(注:不要直接在反应孔中进行倍比稀释)。建议配制成以下浓度:按照稀释方法图例 标准品&样品稀释液直接作为空白孔0ng/mL。如配制5ng/mL标准品:取0.5mL10ng/mL的上述标准品加入含有0.5mL标准品&样品稀释液的EP管中,混匀即可,其余浓度依此类推。
4. 生物su化抗体工作液:实验前计算当次实验所需用量(以100μL/孔计),实际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟,以生物su化抗体稀释液稀释浓缩生物su化抗体(1:100)成工作浓度。当日使用。
5. 酶结合物工作液:实验前计算当次实验所需用量(以100μL/孔计),实际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟,以酶结合物稀释液稀释浓缩HRP酶结合物(1:100)成工作浓度。
当日使用。
人组织蛋白酶抗体(Cath Ab)ELISA试剂盒
实验步骤
1. 准备:准备好所有试剂、材料和器具。
2. 温育:将包被有特异性抗体的酶标板放入37℃温箱中温育30分钟。
3. 加样:分别向各孔中加入标准品、待测样本,轻轻混匀。
4. 温育:将酶标板放入37℃温箱中继续温育30分钟。
5. 洗涤:清洗酶标板,除去未结合的抗原抗体。
6. 加酶标二抗:向各孔中加入酶标二抗,轻轻混匀。
7. 温育:将酶标板放入37℃温箱中继续温育30分钟。
8. 洗涤:清洗酶标板,除去未结合的酶标二抗。
9. 加底物溶液:向各孔中加入底物溶液,轻轻混匀。
10. 显色:将酶标板放入37℃温箱中继续温育15分钟。
11. 终止:向各孔中加入终止液,混匀。
12. 测量:在450nm波长下测量各孔的光密度值(OD值)。
操作注意事项
1. 试剂盒保存在 2-8℃,使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 浓度为 0 的标准品可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释 5 倍,终结果乘以5才是样本终浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
6. 若中英文说明书有误,请以中文说明书为准。
7. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。
8. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
人组织蛋白酶抗体(Cath Ab)ELISA试剂盒
结果判断:
1. 每个标准品的OD值减去空白孔的OD值后作图,如设置复孔,则应取其平均值计算。以标准品的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘出标准曲线。亦可以OD值为横坐标,标准品的浓度为纵坐标,绘出标准曲线。
2. 推荐使用专业的曲线制作软件,如curve expert 1.3或1.4,在软件界面既可根据样品OD值,由标准曲线查出相应的浓度,乘以稀释倍数;亦可将样品的OD值代入标准曲线的拟合方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
3. 若样品OD值高于标准曲线上限,应适当稀释后重测,计算浓度时应乘以稀释倍数。
洗板方法
1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置 1min 后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板 5次。
2.自动洗板机:每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。
新手实验注意事项:
新手以及那些没有固定协作供货商的顾客购买时往往有两种疑虑,首要便是价格,其次,便是质量,国内试剂盒相关于进口试剂盒来说价格自然会低许多。
关于新手的视点来说价格低并不必定就会考虑购买,同时还在犹疑质量问题,由于没有用过新品牌的试剂盒心中总是在怀疑。
利用交叉实验即可辨别是否造假:小鼠ELISA检测试剂盒说明书
1、取出购买的试剂盒A的包被板两条。
2、一条包被板加试剂盒A的标准品做标准曲线。
3、另一条包被板加试剂盒B的标准品做标准曲线。
4、后续操作按照试剂盒说明书进行,加检测抗体、酶复合物和底物。
我司在科研领域积累了丰富的经验,正是为了帮助中国的相关单位能够利用我司的经验与技术优势,为中国民众提供更安全,快捷的生命领域。
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DM-P6321 | 猪巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)酶联免疫试剂盒 | Porcine MIP-5 (Macrophage Inflammatory Protein 5) ELISA Kit |
DM-P6322 | 猪血小板球蛋白β(βTG/PBP/CXCL7/NAP2)酶联免疫试剂盒 | Porcine βTG/PBP/CXCL7/NAP2 (Thromboglobulin, Beta) ELISA Kit |
DM-P6323 | 猪脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(FABP4)酶联免疫试剂盒 | Porcine FABP4 (Fatty Acid-binding Protein 4, Adipocyte) ELISA Kit |
DM-P6324 | 猪蛋白激酶C-θ(PKCθ)酶联免疫试剂盒 | Porcine PKCθ (Protein Kinase C Theta ) ELISA Kit |
DM-P6325 | 猪破骨细胞相关受体(OSCAR)酶联免疫试剂盒 | Porcine OSCAR (Osteoclast Associated Receptor) ELISA Kit |
DM-P6327 | 猪肿瘤坏死因子相关弱凋亡诱导因子(TWEAK)酶联免疫试剂盒 | Porcine TWEAK (Tumour Necrosis Factor Related Weak Inducer of Apoptosis) ELISA Kit |
DM-P6328 | 猪神经肽Y受体Y1(NPYR1)酶联免疫试剂盒 | Porcine NPYR1 (Neuropeptide Y Receptor Y1) ELISA Kit |
DM-P6329 | 猪糖脂转移蛋白(GLTP)酶联免疫试剂盒 | Porcine GLTP (Glycolipid Transfer Protein) ELISA Kit |
DM-P6330 | 猪细胞色素P450家族成员1B1(CYP1B1)酶联免疫试剂盒 | Porcine CYP1B1 (Cytochrome P450 1B1) ELISA Kit |
DM-P6331 | 猪膜联蛋白A5(ANXA5 )酶联免疫试剂盒 | Porcine ANXA5 (Annexin A5) ELISA Kit |
DM-P6332 | 猪卵泡抑素(FST)酶联免疫试剂盒 | Porcine FST (Follistatin) ELISA Kit |
DM-P6333 | 猪核受体相互作用蛋白1(NRIP1)酶联免疫试剂盒 | Porcine NRIP1 (Nuclear Receptor Interacting Protein 1) ELISA Kit |
DM-P6334 | 猪c-myc癌基因产物(c-myc)酶联免疫试剂盒 | Porcine c-myc (c-myc Oncogene Product) ELISA Kit |
DM-P6335 | 猪β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)酶联免疫试剂盒 | Porcine Aβ1-42 (Amyloid Beta Peptide 1-42) ELISA Kit |
DM-P6336 | 猪白细胞分化抗原CD109(CD109)酶联免疫试剂盒 | Porcine CD109 (Cluster of Differentiation 109) ELISA Kit |
DM-P6337 | 猪周期素依赖性激酶2(CDK2)酶联免疫试剂盒 | Porcine CDK2 (Cyclin Dependent Kinase 2) ELISA Kit |
DM-P6338 | 猪多药耐药相关蛋白1(MRP1)酶联免疫试剂盒 | Porcine MRP1 (Multidrug Resistance Associated Protein 1) ELISA Kit |
DM-P6339 | 猪和肽素(CPP)酶联免疫试剂盒 | Porcine CPP (Copeptin) ELISA Kit |
DM-P6340 | 猪抗凝血酶(AT)酶联免疫试剂盒 | Porcine AT (AntiThrombin) ELISA Kit |
DM-P6341 | 猪α甘露糖苷酶(α Manase)酶联免疫试剂盒 | Porcine α Manase (α Mannosidase) ELISA Kit |
DM-P6342 | 猪肌营养不良蛋白关联糖蛋白1(DAG1)酶联免疫试剂盒 | Porcine DAG1 (Dystrophin Associated Glycoprotein 1) ELISA Kit |
DM-P6343 | 猪突触足蛋白(SYNPO)酶联免疫试剂盒 | Porcine SYNPO (Synaptopodin) ELISA Kit |
DM-P6344 | 猪果糖二磷酸醛缩酶C(ALDOC)酶联免疫试剂盒 | Porcine ALDOC (Aldolase C, Fructose Bisphosphate) ELISA Kit |
DM-P6345 | 猪表皮调节素(EREG)酶联免疫试剂盒 | Porcine EREG (Epiregulin) ELISA Kit |
DM-P6346 | 猪胰岛素样生长因子2受体(IGF2R)酶联免疫试剂盒 | Porcine IGF2R (Insulin Like Growth Factor 2 Receptor) ELISA Kit |
DM-P6347 | 猪神经纤维网蛋白1(NRP1)酶联免疫试剂盒 | Porcine NRP1 (Neuropilin 1) ELISA Kit |
DM-P6348 | 猪IgA Fc片段受体(FcaR)酶联免疫试剂盒 | Porcine FcaR (Fc Fragment of IgA Receptor) ELISA Kit |
DM-P6349 | 猪胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)酶联免疫试剂盒 | Porcine IGF2BP3 (Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3) ELISA Kit |
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