On-chip无损伤分选流式细胞仪

传统的细胞分选通过Jet-in-Air方式高速分离细胞，但会对细胞产生一定的损害，对研究细胞原本的性能及特性造成很大的不便。例如，在干细胞和神经细胞的研究中，分选后得到的细胞无法进行培养的案例时有发生。CTC细胞，稀有细胞等分选困难也阻碍科研的发展！

日本On-chip生物技术有限公司针对以往传统流式分选的弊端，于2012年推出了一款对细胞无损伤，确保临床应用的无污染，可以无菌处理操作的流式细胞仪（On-Chip Sort）。 这款小型的仪器使用微流控芯片模块，利用空气压力控制，对模块内的样品流进行细胞分离，最多配置3激光6荧光。以低压对细胞进行分选，从而实现无损伤分离。对于易损伤的神经细胞，在使用此装置进行分选以后，仍然可以充分保持分化功能。另外，由于使用一次性交换型模块，各个样品间保证无污染，也无需清洗流路通道，即使长时间不使用的状态，只要拿一个新的筛选模块，就立即可以开始使用，简单方便。

其创新性和实用性On-chip Sort在2013年10月获得了东京都创新技术优胜奖。
产品特点
使用一次性交换型微流控芯片模块分选

分选时对鞘液没有要求（可使用海水、培养液等）

对细胞进行无损伤分选

无污染分选（可放置在生物安全柜中）

最多可配置3激光6荧光（405nm,488nm,561nm,637nm,785nm）

操作简单，免校正光路和液流

易维护，无需清洗保养

从On-chip Flow(分析型)可直接升级为On-chip Sort(分选型）

产品参数

	On-chip Flow	On-chip Sort
光学系统
激光器	最多配置 3 激光（ 405nm 、 488nm 、 561nm 、 637nm 、 785nm ）
检测参数	前向散射光（ FSC ），侧向散射光（ SSC ）， 6PMT （最多 10 参数）
检测灵敏度	FSC < 0.5um ， SSC < 1.0um
荧光灵敏度	< 200 MESF FITC
数据分析	4 个动态范围， 18bit
脉冲分析	高度、面积、宽度
检测波长	FL1(445/20nm), FL2(543/22nm), FL3(591.5/43nm) FL4(607/24nm), FL5(676/37nm), FL6( >710nm)
液流系统
流动室芯片	可更换的微流控芯片
芯片材料	丙烯酸树脂
液流通道大小	80 μ m × 50 μ m	80 μ m × 80 μ m
流速	500~2000 mm/sec	500mm/sec
鞘液	含有 FBS 的培养基也可
样品体积	10~300ul	10~100ul
鞘液体积	1~3ml
分析和分选
分选方法	—	模块内流体推送方式
纯度	—	>95% （取决于细胞浓度）
得率	—	>80%
细胞损伤	无	无
交叉污染	无
是否无菌	无
压力	0.3~3PSI	0.3PSI
检测速度	4000 events/sec
分选速度	—	20targets/s
开机	几分钟	5min
关机	10s （清洗不是必要程序）
安全性
气溶胶产生	无
大小和重量
大小 (W*H*W ， mm ）	520*330*390	620*330*390
重量（ kg)	35kg	45kg
PC 和软件
PC	笔记本
OS	Windows7,64bit
数据格式	自有格式以及 FCS 3.0

应用领域
包括，但不限于

血液中的癌细胞CTC

神经细胞

细菌的存活数量

微生物

霉菌

精子

蛋白质

淋巴腺

系统单元（乳齿的齿髓)

再生细胞(iPS　ES细胞）

※获得诺贝尔医学奖的京都大学iPS研究院等多数客户在使用

应用举例
1 分选老鼠的胎儿脑部海马神经细胞

使用传统的流式细胞仪和On-chip Sort对分选前后的细胞进行培养，分选后使用PI染色发现细胞没有什明显差别，但3天后细胞的分化增值出现差异化。

图1 神经细胞的无损伤分选

传统的流式细胞仪分选的细胞在后续培养中没有形成轴突，Onchip Sort处理过的细胞和未做分选处理的细胞一样形成轴突 。

本研究是和东京工科大学的铃木郁郎先生共同研究的成果。

2 、精子分选

3、血细胞分选--- 形态完好性保留对比
On-chip分选结果显微镜观察，其分选出的粒细胞形态维持完好，达到真正无损伤 ；而传统的分选方式如Sony号称无损伤的分选仪，其细胞形态发生很大的变化,生理特性的改变就不言而喻了！