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文献和实验Cell:诺奖得主新作!在大量病毒中发现微型 CRISPR 系统,可高效编辑人类和植物基因组
效率。在拟南芥中,Casλ 在内源性 PDS3 基因上表现出高达 18% 的编辑效率,显著高于 CasΦ 的效率,且编辑的效率高度依赖于温度,在 23℃ 没有发生编辑,在 32℃ 发生最高水平的编辑。此外,Casλ 还能够编辑六倍体小麦(比人类基因组大 5 倍的基因组)原生质体中的内源性抗病基因 Snn5。 Casλ RNPs 编辑人类,拟南芥和小麦细胞的内源基因。来源:Cell 通过低温电子显微镜测定,研究人员发现 Casλ-crRNA-dsDNA 复合物呈现出一个紧凑的双叶结构,类似于 Cas
最近,随着基因编辑技术不断曝光,这项技术也越来越火,越来越受到关注,但大部分媒体都只是浅尝辄止进行宣传而已,实质性的怎么操作,具体的步骤却很少涉及。鉴于此,师兄就把张峰的手稿扒拉出来,分享给大家。同时也欢迎大家与我探讨,我的微信号;shixiongcoming,向我申请的时候注意,写上你的理由哦,最近加我的人太多,不注明来由的读者,别怪师兄拒绝你呦。 Genome Engineering Using CRISPR-Cas9 System Le Cong
荧光抗体的质量通常用抗体效价和结合比率(F/P比值)来表示。 1、抗体效价:一般用琼脂双向扩散法测定。中央孔内加抗原(1 mg/ml),抗体稀释度在1:16-1:32呈阳性者较为理想。 2、荧光素(F)与蛋白质(P)结合比率(F/P比值)法 F/P比值系指荧光素与抗体蛋白的克分子比值,是标记抗体质量鉴定的重要指标之一。该比值以1-2(抗球蛋白荧光抗体)或略高于2(抗菌荧光抗体)为宜,否则非特异性染色增强。若荧光素为TRITC,F/P比值在2.1-9.4之间均可用,但以数值较低
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