芬兰百得biohit mLINE系列手动十二道移液器30-3

有图有真相，专业技术工程师带你一起轻松玩转 ChIP 实验

器混匀一次。4°C ，3000 rpm 离心 5 分钟以沉淀细胞核。弃上清，并加入含有 DTT 的缓冲液 B 。这个时候你会发现细胞核不太容易重悬，最好用剪去前端部分的 1 ml 枪头吹打数次进行混匀。再次离心，弃上清，并将沉淀用 300 ul 含有 DTT 的缓冲液 B 再次重悬，并将实验组和对照组细胞核样品分别转移到一个新的 1.5 ml 离心管中。此时，我们已经为后续酶切提供了一个合适的缓冲液体系。虽然试剂盒推荐微球菌酶的一般起始量为 0.5 ul/每 4X 106 细胞，但因为我们仍然想优化

肿瘤成球实验以及肿瘤球体增殖/活力检测方案

方法。 收获细胞（保证健康的单细胞悬液）。 使用胰蛋白酶-EDTA 溶液 ( T3924 ) 分离上述贴壁细胞。Millicell® Digital Cell Imager（MDCI10000）观察到细胞融合度应为80-90%，且状态良好。 以300 x g离心细胞悬液 5分钟并吸出上清液。将细胞重悬于少量培养物中，例如 3-5 mL 的 3dGRO™ 球状体培养基 ( S3077 ) 注：可让细胞穿过40 µM细胞过滤器或带细胞过滤器卡扣盖的5 mL 圆底聚苯乙烯试管，以实现单细胞悬浮。

干货！组织解离新手入门&4大踩坑现场与避坑指南｜单细胞/原代细胞/流式必看

化进阶方案（单样本仅需3 min），文末附不同类型组织解离保姆级教程。 方案一：手动解离： 组织离体剪碎 (＜1 mm³) ──> 37°C酶法摇床消化 (15-60 min) ──>终止消化+70 μm滤网过滤 ──> 300-500×g低速离心收集细胞沉淀 ──> 活细胞率计数 ──> 下游检测or建模 步骤1：样本离体与剪碎（前置重要的一步） ·组织离体后，必须放置在含有双抗/三抗的4°C组织保存液中。严禁冰冻，必须在 2-4 h内开始处理，否则时间越长细胞死亡率越高。 ·将组织转移至无菌