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- 2025年07月11日
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100
- 供应商：
上海远慕生物科技
- 规格：
250g
货号：YM-BG00536
保质期： 24个月
供应大豆-干酪素消化物琼脂培养基【培养基配制】
先计算所需培养基之份量 (体积)，依已商品化培养基产品上之指示称取所需克数，并加入蒸馏水。
1）搅拌均匀后，于微波炉中加热数分钟将所有成份溶解后
2）利用分注器进行分装(切勿锁紧盖子！)。接著放入杀菌釜中进行灭菌工作
3）若是配制slant 则需于灭完菌后趁 培养基未凝固前锁上盖子并斜放 (可用厚书辅助)；若是配置broth或deep agar 可等其冷却后再锁紧盖子，并放入4℃冰箱中保存备用。
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供应大豆-干酪素消化物琼脂培养基【培养基种类与基本成分】
1）氨基酸是组成蛋白质的基本单位。不同种类的细胞对氨基酸的要求各异，但有几种氨基酸细胞自身不能合成，必须依靠培养液提供，这几种氨基酸称为必需氨基酸。其中谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸，在缺少谷氨酰胺时，细胞生长不良而死亡。因此，各种培养液中都有较大量的谷氨酰胺。但是，由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置于-20℃冰箱中保存，在使用前加入培养液内。已含谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱中储存2周以上时，还应重新加入原来量的谷氨酰胺。
2）碳水化合物是细胞生长主要能量来源，其中有的是合成蛋白质和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脱氧核糖、丙酮酸钠和醋酸等。
3）培养液中无机盐的主要功能是帮助细胞维持渗透压平衡。此外，通过提供钠、钾和钙离子，帮助细胞调节细胞膜功能。培养液的渗透压是一个非常重要的因素，细胞通常可耐受260mOsm/kg 320 mOsm/kg。标准培养液的渗透压在此范围内波动。特别注意：向培养液中加入其它物质有可能会明显改变培养液的渗透压，特别是溶于强酸或强碱中的物质。向培养液中添加HEPES时需按以下方法调节钠离子浓度。
4）大多数细胞所需pH 在 7.2 - 7.4。但是，细胞培养最适pH值随培养的细胞种类不同而不同。成纤维细胞喜欢较高pH (7.4 - 7.7)，而传代转化细胞系则需要偏酸pH (7.0 - 7.4)。由于多数培养液靠碳酸氢钠(NaHCO3)与CO2体系进行缓冲，因此，气相中的CO2浓度应与培养液中碳酸氢钠浓度相平衡。如果气相或空气中CO2浓度设定在5%，培养液中NaHCO3的加入量为1.97g/L；如果CO2浓度维持在10%，培养液中NaHCO3的加入量为3.95g/L。细胞培养瓶盖不应拧得太紧，以保证气体交换。 HEPES 是一种非离子缓冲液，在pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力，但是非常昂贵，在高浓度时对一些细胞可能有毒.HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠(0.34g/L)共用,以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。在这种培养条件下，细胞培养瓶的盖子应拧紧，以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中。大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂，酸性培养液呈橙黄色，碱性培养液呈深红色。
5）在细胞培养中，尽管血清是维生素重要来源，但是许多培养基中添加了各种维生素以适合更多的细胞系生长。
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文献和实验，每天换液一次。 8、用心肌分化培养基（II）进行换液，放置在 37℃，5%CO2 的培养箱中培养 7 天，每天换液一次。 9、用心肌分化培养基（III）进行换液，放置在 37℃，5%CO2 的培养箱中培养 2 天，每天换液一次。 10、分化后，吸出原培养基，加入含 2% I 型胶原蛋白酶和 20% FBS 的 PBS 溶液（含 Ca2+ 和 Mg2+），消化 60min 后，加入 0.25% Trypsin-EDTA 再消化 10min。 11、加入 MEM 完全培养基（10%FBS
，例如细菌的质粒、噬菌体、病毒等，常用的载体一般为质粒；根据需要可直接从公司购买合适的载体，也可以自己构建。（3）连接：目的 DNA 片段和适当载体的连接, 一般采用核酸内切酶分别消化 DNA 片段和载体，使它们的末端能够连接到一起构成重组 DNA 分子。由于所用内切酶的切割特点不同，产生三种连接方式：粘端连接、平端连接和不相配的连接。（4）转化：将连接的重组 DNA 产物导入合适的宿主细胞，使其在宿主细胞内复制扩增或表达，赋予宿主细胞新的生物特征。（5）克隆化：重组 DNA 分子转化大肠杆菌后，在平板培养基
培养基凝固不充分或滑出平皿 原因：a. 顶层或底层培养基中琼脂粉含量低；b. 顶层培养基中加入的溶剂或待测物酸化，导致凝胶不充分；7、如何判断 Ames 实验结果是否为假阳性 将经受试物和阳性对照物处理的 Ames 菌落进行增菌培养后接种于无组氨酸的培养基上, 观察比较细菌的生长情况。如果经受试 物处理的菌株不能生长在无组氨酸的培养基中, 而经阳性对照物处 理的菌株则可以生长在无组氨酸的培养基上, 则说明经受试物处理 的菌株没有发生突变，试验中所观察到的菌落数增加是假阳性。
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