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- 2025年07月15日
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100
- 供应商：
上海远慕生物科技
- 规格：
250g
货号：YM-BG00340
保质期： 24个月
供应亮绿乳糖培养基【培养基配制】
先计算所需培养基之份量 (体积)，依已商品化培养基产品上之指示称取所需克数，并加入蒸馏水。
1）搅拌均匀后，于微波炉中加热数分钟将所有成份溶解后
2）利用分注器进行分装(切勿锁紧盖子！)。接著放入杀菌釜中进行灭菌工作
3）若是配制slant 则需于灭完菌后趁 培养基未凝固前锁上盖子并斜放 (可用厚书辅助)；若是配置broth或deep agar 可等其冷却后再锁紧盖子，并放入4℃冰箱中保存备用。
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供应亮绿乳糖培养基【培养基种类与基本成分】
1）氨基酸是组成蛋白质的基本单位。不同种类的细胞对氨基酸的要求各异，但有几种氨基酸细胞自身不能合成，必须依靠培养液提供，这几种氨基酸称为必需氨基酸。其中谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸，在缺少谷氨酰胺时，细胞生长不良而死亡。因此，各种培养液中都有较大量的谷氨酰胺。但是，由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置于-20℃冰箱中保存，在使用前加入培养液内。已含谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱中储存2周以上时，还应重新加入原来量的谷氨酰胺。
2）碳水化合物是细胞生长主要能量来源，其中有的是合成蛋白质和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脱氧核糖、丙酮酸钠和醋酸等。
3）培养液中无机盐的主要功能是帮助细胞维持渗透压平衡。此外，通过提供钠、钾和钙离子，帮助细胞调节细胞膜功能。培养液的渗透压是一个非常重要的因素，细胞通常可耐受260mOsm/kg 320 mOsm/kg。标准培养液的渗透压在此范围内波动。特别注意：向培养液中加入其它物质有可能会明显改变培养液的渗透压，特别是溶于强酸或强碱中的物质。向培养液中添加HEPES时需按以下方法调节钠离子浓度。
4）大多数细胞所需pH 在 7.2 - 7.4。但是，细胞培养最适pH值随培养的细胞种类不同而不同。成纤维细胞喜欢较高pH (7.4 - 7.7)，而传代转化细胞系则需要偏酸pH (7.0 - 7.4)。由于多数培养液靠碳酸氢钠(NaHCO3)与CO2体系进行缓冲，因此，气相中的CO2浓度应与培养液中碳酸氢钠浓度相平衡。如果气相或空气中CO2浓度设定在5%，培养液中NaHCO3的加入量为1.97g/L；如果CO2浓度维持在10%，培养液中NaHCO3的加入量为3.95g/L。细胞培养瓶盖不应拧得太紧，以保证气体交换。 HEPES 是一种非离子缓冲液，在pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力，但是非常昂贵，在高浓度时对一些细胞可能有毒.HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠(0.34g/L)共用,以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。在这种培养条件下，细胞培养瓶的盖子应拧紧，以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中。大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂，酸性培养液呈橙黄色，碱性培养液呈深红色。
5）在细胞培养中，尽管血清是维生素重要来源，但是许多培养基中添加了各种维生素以适合更多的细胞系生长。
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文献和实验异丙基-1-硫代β-D吡喃（型）半乳糖 isop-ropyl-1-thio-β-D-galactopyranoside
异丙基 -1-硫代β -D吡喃（型）半乳糖 isop-ropyl-1-thio-β -D-galactopyranoside 为 isopropyl-1-thio-β -D-galactopyranoside的缩写。是诱导大肠杆菌乳糖操纵子酶合成的强力诱导物。在培养基中加入该物 10-4 克分子时，即可通过存在于大肠杆菌细胞膜中的微量半乳糖苷渗透酶而被参入至细菌体内。通常诱导物质即根据这种通过操纵子的作用制造的β -半乳糖糖苷酶而被利用于代谢的。但 IPTG等不能
分析： 为什么阴性对照会有带？我想起表达毒性蛋白的protocol. 表达毒性蛋白的时候，由于DE3可能根本就不长，或者长得很慢，这时候我们会在培养基中加glucose。当培养基中有其他首选碳源，如glucose时，细菌会优先选择glucose，而glucose会抑制cAMP的活性从而关闭乳糖操纵子。 为什么要加入glucose呢？我们用的DYT或者LB培养基中含有丰富的tryptone。后者可能含有微量的乳糖。 所以虽然没有加IPTG，其中的lactose同样可能诱导蛋白的表达。这样毒性
. 目的蛋白应该在30 kD，但分子量显示是36 kD左右（这个问题是个低级错误，接下来的帖子会指出）。原因分析：为什么阴性对照会有带？我想起表达毒性蛋白的protocol. 表达毒性蛋白的时候，由于DE3可能根本就不长，或者长得很慢，这时候我们会在培养基中加glucose。当培养基中有其他首选碳源，如glucose时，细菌会优先选择glucose，而glucose会抑制cAMP的活性从而关闭乳糖操纵子。为什么要加入glucose呢？我们用的DYT或者LB培养基中含有丰富的tryptone。后者可能
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