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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温
- 库存:
大量
- 供应商:
上海善然生物科技有限公司
- 规格:
20ug
| G8031 | pH6HTC His6HaloTag® T7 Vector | 20ug | 2,318 |
| G8080 | CellTiter-Blue® Cell Viability Assay | 20ml | 892 |
| G8081 | CellTiter-Blue® Cell Viability Assay | 100ml | 2,543 |
| G8082 | CellTiter-Blue® Cell Viability Assay | 10 × 100ml | 21,978 |
| G8090 | Caspase-Glo® 3/7 Assay | 2.5ml | 969 |
| G8091 | Caspase-Glo® 3/7 Assay | 10ml | 3,247 |
| G8092 | Caspase-Glo® 3/7 Assay | 100ml | 16,730 |
| G8093 | Caspase-Glo® 3/7 Assay | 10 × 10ml | 25,026 |
| G8200 | Caspase-Glo® 8 Assay | 2.5ml | 1,028 |
| G8201 | Caspase-Glo® 8 Assay | 10ml | 3,439 |
| G8202 | Caspase-Glo® 8 Assay | 100ml | 17,724 |
| G8210 | Caspase-Glo® 9 Assay | 2.5ml | 1,028 |
| G8211 | Caspase-Glo® 9 Assay | 10ml | 3,439 |
| G8212 | Caspase-Glo® 9 Assay | 100ml | 18,278 |
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文献和实验11载体可让目的基因与内含肽的裂解位点直接相连,在4℃利用 DTT 诱导内含肽的肽键裂解活性,使得最后纯化得到的天然蛋白不带有源自于载体的额外的蛋白残基,同时低温也最大程度地保证了蛋白不被降解. 但是如果目标蛋白的二硫键丰富,还原剂的使用可能影响二硫键稳定,NEB推出改良的IMPACT-TWIN 蛋白纯化系统,这个更加创新的方法,可以调整pH值(pH6-7)和温度改变诱导intein自动裂解,同样不需要蛋白酶参与.这个温和、经济、操作方便的蛋白纯化方法更能适应工业化生产控制,有很好
证了蛋白不被降解。但是如果目标蛋白的二硫键丰富,还原剂的使用可能影响二硫键稳定,NEB推出改良的IMPACT-TWIN 蛋白纯化系统,这个更加创新的方法,可以调整pH值(pH6-7)和温度改变诱导intein自动裂解,同样不需要蛋白酶参与。这个温和、经济、操作方便的蛋白纯化方法更能适应工业化生产控制,有很好的工业化前景。IMPACT-TWIN系统包括两个大肠杆菌表达载体――pTWIN1,pTWIN2。之所以叫做Twin,原因在于pTWIN的设计在多克隆位点两端都各有一段intein和CBD,排列
IMPACT™-TWIN 蛋白纯化系统,可以不用任何蛋白酶,表达N-Cys的蛋白,一步过柱纯化。
蛋白分离释放。采用MESNA(2-mercaptoethanesulfonic acid)诱导内含肽裂解,目的蛋白C端带有活化的巯脂基因,可与N端为半胱氨酸的多肽高效连接。 图2: 利用pH值和温度改变来诱导Intein1裂解进行蛋白纯化: 采用pTWIN载体系统表达蛋白,目的蛋白N末端与内含肽形成融合,通过融合蛋白中的几丁质结合蛋白(CBD)进行几丁质柱层析,进而通过pH值(pH6-7)和温度改变诱导内含肽裂解,切割内含肽与目的蛋白之间的肽键,将目的蛋白分离释放,而几丁质结合蛋白与内含肽仍结合
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