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| 品牌 | 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 |
|---|---|---|---|
| NEB | E8210 | Ph.D™.-12 噬菌体展示肽库试剂盒 v2 | Ph.D™.-12 Phage Display Peptide Library Kit v2 |
| 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| E8210S | Ph.D.-12™ 噬菌体展示肽库试剂盒 v2 | Ph.D.-12 Phage Display Peptide Library Kit v2 | 1 set |
产品特点
The Ph.D.-12™ Phage Display Peptide Library Kit v2 contains the Ph.D.-12 Phage Display Peptide Library, a DYKDDDDK Mouse monoclonal antibody and Protein G Magnetic Beads for a panning control experiment, and enough -96gIII sequencing primer for >50 sequencing reactions. The Ph.D.-12 Phage Display Peptide Library is a combinatorial library of random 12-mer peptides fused to the N-terminus of a minor coat protein (pIII) of M13 phage. The library consists of ~109 electroporated (i.e., unique) sequences.
- Ready to use complex phage library (~109 clones)
- Monoclonal antibody and Protein G Magnetic Beads included for new control panning experiment
- Panning against DYKDDDDK Mouse monoclonal antibody yields more reliable epitope results than former target protein (streptavidin)
- Does not require helper phage for amplification
- Inherent link between phenotype and genotype allows screening of billions of clones in a single microtiter well or Eppendorf tube
噬菌体展示是一种筛选技术,可将一系列多肽或蛋白展示在噬菌体病毒颗粒的表面,而编码这些多肽或蛋白的遗传物质位于病毒颗粒的内部(1-3)。这在各展示蛋白序列与其编码 DNA 之间产生了物理关联,从而能够通过称为淘选(4)的体外筛选流程,快速筛选出与给定目标分子(抗体、酶、细胞表面受体等)亲和结合的噬菌体展示肽。最简单的淘选流程(图 1):将展示不同肽的噬菌体库与包被在平板(或磁珠)上的靶分子进行温育,洗掉未结合的噬菌体,再洗脱特异性结合的噬菌体,然后扩增洗脱的噬菌体,并重复上述结合/扩增过程,富集表面展示有与靶分子结合的肽序列的噬菌体。经过 3–4 轮淘选后,通过 DNA 测序和结合试验得到表征单个克隆。
Ph.D.-12 噬菌体展示肽库试剂盒 v2 的制备原理是将随机十二肽组合库融合表达于 M13 噬菌体次要外壳蛋白(pIII)的 N 端(5-9)。这种肽后跟随一个直接位于野生型 pIII 序列之前的短间隔序列(Gly-Gly-Gly)。该库包含约 10 亿个电穿孔序列,在提供的 10 μl 噬菌体中经扩增一次,每个序列即可产生约 100 个拷贝。
展示肽形式:X12-GGG-野生型 M13 pIII
备注:以上仅为 E8210 的部分产品信息,如需NEB货号 E8210 的完整产品信息及相关的实验操作手册等等,请通过NEB官网查找对应的货号获取。
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文献和实验蛋白融合,即使插入片段内含有终止密码子也可以被表达和展示。融合序列大小:M13噬菌体展示肽库为7肽、12肽和环7肽,产品用途 :NEBM13噬菌体展示肽库可用于定位抗原决定簇, 确定蛋白质相互作用位点, 鉴定酶的底物或抑制物, 鉴定受体激活物或抑制剂, 研制多肽药物,开发新药, 肿瘤治疗和 疫苗制造,用途广泛。T7噬菌体肽库可用于蛋白相互作用 (例如激素,抗体,受体),酶分析, 酶抑制;核酸-蛋白相互作用,抗原决定簇作图,突变分析。
NEB的M13噬菌体随机肽库和NOVAGE的T7噬菌体肽库的优缺点?
菌。极大地简化了每轮淘选过程中的噬菌体纯化步骤,只用简单的PEG沉淀方法即可。 T7是裂解性的,其展示的蛋白不需分泌。这一优点使更多的序列可能被展示。 但不利于提纯 。融合方式:M13噬菌体N端与pIII蛋白融合,不适合克隆cDNA,因为cDNA中为oligo d(T))常位于翻译终止密码子的下游。T7噬菌体C端与T7基因10 衣壳蛋白融合,即使插入片段内含有终止密码子也可以被表达和展示。融合序列大小:M13噬菌体展示肽库为7肽、12肽和环7肽,价格:NEB噬菌体肽库:3969人民币; T7噬菌体展示
种产品的说明书: PhD-12PhageDisplay_man.pdf (173.97k) 我一直就对phage display感兴趣,现在正表达用随机肽库筛选到的肽。我觉得你先要看你需要用的是构型文库,还是线性文库。或者不确定,干脆两种都建咯。NEB公司的试剂盒是比较好用啦,什么东西都现成。phage display技术本身没有太多难点,主要还是其它方面的吧,其实建文库容易,但筛选到后,活性是另一个大问题啦!呵呵,祝你好运,可以交流。 因为我筛选的是随机肽库,得到阳性克隆后,直接
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