Corning 15ml灭菌带盖锥形底离心管（cf 4300

Tandem Affinity Purification of Protein Complexes in Mouse Embryonic Stem Cells Using In Vivo Biotinylation

) 6‐well, 24‐well, 48‐well, and 10‐cm IEF plates (see recipe ) 15‐ml conical tubes (Corning, cat. no. 430791)

各类细胞培养小结

细胞的胰蛋白酶注入50ml锥形离心管中，加入小牛血清2ml终止酶反应。再以30ml PBS冲洗管腔，流出液一并入离心管，1000r/min离心10min，弃上清，加入含有10%小牛血清的DMEM [或IMDM(Dibco)？]培养液，充分混合制成细胞悬液。取0.1ml细胞悬液在血细胞计数板计数。最后调细胞数，以1×105/ml接种至24孔培养板中，每孔1ml。置于5%CO2，37℃静止培养24h更换培养液，以除去未贴壁的细胞。以后每隔2d换液1次，以维持细胞的营养和内环境的稳定。 胰蛋白酶溶液（100