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上海善然生物科技有限公司
化学发光是指当底物发生化学反应,产生的能量以光的形式释放出来的过程。使用化学发光可以通过多次曝光获得最好的成像结果;还可以将检测试剂完全去除,再对其他目的蛋白进行检测并成像,或对检测条件进行优化。
化学发光具有很宽的线性响应范围,从而可以检测并定量很宽浓度范围的蛋白质。最重要的是,化学发光在所有的检测方法中具有最高的灵敏度。
在化学发光免疫印迹中,底物是反应限制试剂,一旦其耗尽,光就会逐渐变弱并消失。因此实验中一定要使用适当稀释浓度的抗体,才能在几小时内产生稳定的光信号输出,从而维持蛋白质检测的一致性和灵敏度。当抗体没被足够稀释时,永远不会获得稳定的光信号输出。系统中太多的酶会快速氧化底物并终止信号。
Thermo Scientific Pierce及Millipore化学发光底物主要分类如下:
| 品牌 | 全球货号 | 品名 | 规格 | 报价 | 中国货号 | 底物类别 |
| PIERCE | 32106 | Pierce ECL Western Blotting Substrate 500 mL. | 500 ML KIT | ¥1,975.00 | 普通型ECL | |
| 32109 | Pierce ECL Western Blotting Substrate, 50 mL. | 50 ML KIT | ¥575.00 | |||
| 32209 | Pierce ECL Western Blotting Substrate, 250 mL. | 250 ML KIT | ¥1,412.00 | |||
| NCI4106 | ECL Western Blotting substrate | 500 ml | ¥1,150.00 | 32106 | ||
| NCI4109 | ECL Western Blotting substrate | 50 ml | ¥230.00 | 32109 | ||
| 34077 | SuperSignal (R) West PICO Chemiluminescent Substrate, | 100 ML | ¥874.00 | 皮克级 | ||
| 34078 | SuperSignal (R) West Pico Chemiluminescent Substrate | 1 L | ¥4,213.00 | |||
| 34079 | SuperSignal (R) West Pico Trial Kit, 50 mLs. | 50mlTRIAL KIT | ¥551.00 | |||
| 34080 | SuperSignal (R) West Pico Chemiluminescent Substrate, 500 mL | KIT/500 ML | ¥2,574.00 | |||
| 34087 | SuperSignal(R) WEST Pico Chemiluminescent Substrate | 1 EA =200 ML | ¥1,508.00 | |||
| NCI5079 | SuperSignal West Pico | 50ml | ¥290.00 | 34079 | ||
| NCI5080 | SuperSignal West Pico | 500ml | ¥1,650.00 | 34080 | ||
| 34075 | SuperSignal (R) West Dura Extended Duration Substrate | 100 ML | ¥2,980.00 | 持久性 | ||
| 34076 | SuperSignal (R) West Dura Extended Duration Substrate | 200 ML | ¥4,980.00 | |||
| 34094 | SuperSignal (R) West Femto Trial Kit | 20 ML | ¥1,113.00 | 超灵敏飞克级 | ||
| 34095 | SuperSignal (R) West Femto Maximum Sensitivity Substrate | 100mL KIT | ¥3,866.00 | |||
| 34096 | SuperSignal (R) West Femto Maximum Sensitivity Substrate | 200 ML | ¥6,380.00 | |||
| Millipore | WBKLS0050 | IMMOBILON WESTERN CHEMILUM HRP SUBSTRATE 50ml | 50ml | ¥485.00 | ||
| WBKLS0100 | IMMOBILON WESTERN CHEMILUM HRP SUBSTRATE 100ml | 100ml | ¥737.20 | |||
| WBKLS0500 | IMMOBILON WESTERN CHEMILUM HRP SUBSTRATE 500ml | 500ml | ¥2,298.90 |
Thermo Scientific Pierce其产品特点如下:
- 灵敏:信号强背景低,所需抗原抗体量少
- 持久:发光时间长,可进行反复曝光,进行结果优化,而不需要重复 Blot
- 快捷:操作简单方便,且数秒内即可产生强烈信号
- 定量:使用反射型显像密度计或者 CCD 相机扫描已曝光的 X 光片,可对目的蛋白进行定量
- 稳定:产品有效期长, 4 ℃可保存 1 年;且曝光后 X 光片上的印迹不褪色,可使实验结果长期保存
Millipore其产品特点如下:1 灵敏度高-能够检测飞克级(10-15g)的蛋白质,是检测低丰度蛋白质必不可少的工具。2 节省抗体-对于中等或高丰度蛋白,该底物所使用的一抗和二抗的量比使用传统检测底物所需的量低20 倍3 通用性强-胜任所有的Western杂交或点杂交/斑点杂交/狭缝杂交实验,与PVDF膜和NC膜都兼容4 低背景-由于抗体浓度的降低,也有助于减少非特异的杂交背景,使Western的结果更加清晰,信噪 比更高
类别
参数Western Blotting Substrate普通型 ECL底物 SuperSignal West Pico化学发光底物 SuperSignal West Dura持久性化学发光底物 SuperSignal West Femto最高灵敏度化学发光底物 密理博Immobilon™
Western
化学发光HRP底物主要优点 只需同类竞争ECL底物价格的一半即可获得同样的信号强度 相比同类竞争产品,具有更好的信号、更低的价格 可获得持续的信号,是用于成像设备的理想产品;特别适合CCD仪器检测 对HRP检测系统是最灵敏的底物,主要用于极端微量样品的检测或抗体珍稀样品的检测 胜任所有的Western杂交或点杂交/斑点杂交/狭缝杂交实验,与PVDF膜和NC膜都兼容Western的结果更加清晰
更低的检测极限 低-ug (10 -6) 低-pg (10 -12) 中-fg (10 -14) 低-fg (10 -15) ~10 -15g) 高-picomole (10 -11) 中-attomole (10 -17) 高-zeptomole (10 -19) 中-zeptomole (10 -20) 信号持续时间 30min-2h 6-8h 24h 8h 2h 建议抗体稀释度 一抗:1:100-1:5000 一抗:1:1000-1:5000 一抗:1:1000-1:50000 一抗:1:5000-1:100000 一抗1:1000–1:20000; 二抗:1:1000-1:5000 二抗:1:20000-1:100000 二抗:1:50000-1:250000 二抗:1:100000-1:500000 二抗1:20000–1:200000. 室温工作溶液稳定性 1h 24h 24h 8h 储液存放时间 4度一年 室温一年 室温一年 4度一年或室温六个月 4度一年 介绍 http://www.piercenet.com/products/browse.cfm?fldID=560371F1-8179-4323-92AD-4A96296F8929&WT.mc_id=keynum http://www.piercenet.com/browse.cfm?fldID=01041101&WT.mc_id=keynum http://www.piercenet.com/products/browse.cfm?fldID=01041102&WT.mc_id=keynum http://www.piercenet.com/products/browse.cfm?fldID=01041106&WT.mc_id=keynum http://www.millipore.com/catalogue/module/C85688 说明书 http://www.piercenet.com/files/1743as4.pdf http://www.piercenet.com/files/1743as4.pdf http://www.piercenet
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