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6个月
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100
- 供应商:
上海古朵生物有限公司
- 规格:
10ml
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文献和实验生物素:将组织切片用0.0l%亲和素溶液室温处理10~20分钟,使其结合位点饱和,以消除内源性生物素的活性。也可购买生物素阻断剂试剂盒,其中A液为亲和素.B液为生物素。使用时加A液l滴,室温10分钟,PBS冲洗3次,每次2分钟;加B液1滴。室温10分钟.PBS冲洗3次,每次2分钟。
决定簇。通过抗原修复,使得细胞内抗原决定族重新暴露,提高抗原检测率。常用的修复方法从强到弱一般分为三种,高压加热修复、微波修复、胰酶修复。其中高压加热修复这一方法简便易操作,效果也更好。使用高压加热修复对于修复温度和时间的把握十分重要,温度越高修复时间越短,温度与修复时间呈负相关。修复结束后注意室温冷却,让蛋白自然复性。其次,尽量使用过量的抗原修复液,防止高温液体挥发干涸,对切片造成不可逆的损伤。 灭活内源性过氧化物酶和生物素 在传统的 ABC 法和 SP 法中,免疫组化反应容易受到内源性过氧化物酶和生物素
min 左右(只要你觉得修复液的温度达室温即可)。 5、细胞通透:目的是使抗体能够充分地进入胞内进行结合反应。一般用Triton X-100、蛋白酶k等通透液。如 Triton X-100 可以溶解细胞膜、细胞核膜、细胞器膜上的脂质而使抗体及大分子结构的物质进入胞浆和胞核内,故在细胞免疫组化时尤为推荐使用,这样抗体就能顺利进入胞内与相应抗原结合。在免疫组织化学(>10um 厚切片) 和免疫细胞化学中一般用Triton X-100 作为细胞通透剂,在膜上打孔。 6、灭活内源性过氧化物酶和生物素:在传统
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