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文献和实验流式课堂 | 裂红 or 分离液?外周血不同制备方法应用场景
外周血样本采集完毕后,我们需要对其中的待测单细胞进行提取。针对外周血样本,最常使用的样本制备方法有两种: 一. 裂红法 利用红细胞裂解液,去除红细胞 二. Ficoll 法 利用不同细胞的沉降系数差异,进行梯度密度离心,提取 PBMC 两种方法分别在什么场景下应用?接着往下看。 裂红法 裂红法,即裂解样本中的红细胞。血液中的红细胞比白细胞多 10-100 倍,红细胞数量过多,会影响细胞群体的分析。因此,我们在做血液样本检测时,经常需要裂解红细胞。 裂红前 裂红后 01
Alkaline agarose gel electrophoresis
buffer (300mM NaOH, 6mM EDTA, 18% Ficoll 400, 0.15% bromocresol green, 0.25% xylene cyanol FF) 10 x Alkaline agarose electrophoresis buffer (500mM NaOH, 10mM EDTA, pH 8.0, made fresh for each use) 1) Melt the required amount of powdered agarose
and resuspend the cells in 20 to 50 ml PBS and repellet the cells at 1,500 X g for 10 min.3. Remove the supernatant and resuspend the cells in 2 ml RSB and allow cells to swell for 5 min on ice.4. Add 2 ml RSB/NP-40 and leave on ice for 5 min and check for cell
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