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文献和实验的…… 我买的是ROCHE的1mg装human fibronectin,用的是corning的24孔板,最后对各种方案进行了摸索,结果见下面的帖子。 刚刚又再看了一下浓度的问题,大致归结为以下三种方案: 1.园子里大部分战友用的还是50微克/毫升的浓度,室温或37度下放置30至40分钟。 2.我请教了有的人用的是10微克/毫升,4度过夜。 3.还有我见一篇文献《成人外周血内皮祖细胞分离和诱导分化》中南
的是ROCHE的1mg装human fibronectin,用的是corning的24孔板,最后对各种方案进行了摸索,结果见下面的帖子。 刚刚又再看了一下浓度的问题,大致归结为以下三种方案: 1.园子里大部分战友用的还是50微克/毫升的浓度,室温或37度下放置30至40分钟。 2.我请教了有的人用的是10微克/毫升,4度过夜。 3.还有我见一篇文献《成人外周血内皮祖细胞分离和诱导分化》中南大学学报(医学版)J Cent South Univ (M ed Sci) 2005, 30 (5)上面写
细胞的胰蛋白酶注入50ml锥形离心管中,加入小牛血清2ml终止酶反应。再以30ml PBS冲洗管腔,流出液一并入离心管,1000r/min离心10min,弃上清,加入含有10%小牛血清的DMEM [或IMDM(Dibco)?]培养液,充分混合制成细胞悬液。取0.1ml细胞悬液在血细胞计数板计数。最后调细胞数,以1×105/ml接种至24孔培养板中,每孔1ml。置于5%CO2,37℃静止培养24h更换培养液,以除去未贴壁的细胞。以后每隔2d换液1次,以维持细胞的营养和内环境的稳定。 胰蛋白酶溶液(100
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