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- 文献和实验
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大量
- 供应商:
上海善然生物科技有限公司
- 现货状态:
现货
- 规格:
个
| XY0405 |
吸咀盒200µl |
10 |
个/ 10元 |
96孔 |
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文献和实验微量样品基因组 DNA 提取试剂盒操作指南(DP316) ——血清血浆
以下操作按照天根产品 DP316 微量样品基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 100 μl以内抗凝全血(本实验以血清为例)2. 无水乙醇3. 移液器及配套无菌枪头(10 μl, 200 μl ,1ml),1.5 ml 离心管4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机实验准备-试剂盒准备:使用前先在漂洗液 PW 和 GD 中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签
样本 1) 取50 mg组织置于培养皿中,手术剪剪碎,加入200 μL预冷的裂解液工作液,冰上用玻璃匀浆器匀浆 (组织量加倍时,加入的预冷裂解液也加倍)。 2) 将匀浆好的样本转移到1.5 mL的离心管中,冰浴放置5 min裂解。 3.12,000 rpm在4°C下离心10-15 min。 4.小心地吸取上清转移至新的EP管中,并置于冰上待用。 5.立即测定Caspase的酶活性或者-70°C保存样本,亦可取少量样本用Bradford法[E-BC-K168,详询当地经销商]测定蛋白浓度。 6.Caspase
或 4℃过夜以捕获免疫沉淀复合物。 离心(3000 rpm,5 min)收集 Agarose 珠子,弃掉上清,用 800 µL-1000µL 预冷的 PBS 缓冲液洗涤珠子 3 次。(小心吸取上清,避免触碰底部珠子) 收集沉淀,加 60 µL 2×SDS 蛋白上样缓冲液中重悬沉淀,轻混均匀后煮沸 5 min,12000 rpm 离心 10 min。 将上清转移至一新离心管,进行 Western 检测。
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