培养瓶25CM2密闭斜颈TC处理（BD Falcon）

细胞培养耗材选购杂谈

：Pharmingen、Clontech和Discovery Labware。Discovery Labware本来只有Falcon，后来加了Biocoat，前段时间BD收购了Genetest，也算在了Labware的下面，但其中最主要的就是Falcon。据BD说，Faclon是这个领域里最早的牌子，国外占有率最高，一年能卖上亿美金，Corning什么的都是后来者，没得比。另外BD在培养器皿的处理方面很有一套，据她的技术人员说，这些培养器皿都是在密闭环境下处理，表面处理更均一；其它牌子都是在一个开放的环境下进行

各种用途的细胞培养瓶特性

改性处理后，可以让细胞更好的进行贴壁培养，这样根据细胞贴壁面积又可以分为25～175cm2多种。 国产的 细胞培养 瓶一般盖子都是封闭的，不带内垫，常用于密闭培养，可保证其密闭性;进口的培养瓶的盖子样式比较多：密闭盖、聚酯盖、透气盖、隔垫盖等。密闭盖的性能和国产的是相同的，聚酯盖常用于开放培养，只需轻轻旋松瓶盖便可保证瓶内气体与环境中气体的交换。透气盖是在瓶盖中加了0.2μm疏水滤膜，提供无菌气体交换，减少污染的风险。常用于开放培养，推荐用于CO2

细胞培养注意事项（入门级）

达到70－80%就可以传代。早点传代也可以。如果是贴壁生长的细胞：1） 培养皿/瓶用枪头或移液管吸去原培养液；2） 无菌PBS或无菌生理盐水洗涤3次（按培养体积加入）；3） 加入适量胰酶消化适当时间（一般胰酶为0.25%；9cm/10cm培养皿和25cm培养瓶，一次加入1mL胰酶。消化时间视细胞类型等多种情况综合考虑，一般如果是细胞株，非原代培养，消化1－2分钟足矣）；4） 用枪头吹打数十次（视细胞类型而定。一般细胞株30－50次吧，耗时一般2分钟左右）；5） 加入适量体积完全培养基终止