培养瓶225CM2 透气/密封盖（NUNC）

细胞培养注意事项（入门级）

达到70－80%就可以传代。早点传代也可以。如果是贴壁生长的细胞：1） 培养皿/瓶用枪头或移液管吸去原培养液；2） 无菌PBS或无菌生理盐水洗涤3次（按培养体积加入）；3） 加入适量胰酶消化适当时间（一般胰酶为0.25%；9cm/10cm培养皿和25cm培养瓶，一次加入1mL胰酶。消化时间视细胞类型等多种情况综合考虑，一般如果是细胞株，非原代培养，消化1－2分钟足矣）；4） 用枪头吹打数十次（视细胞类型而定。一般细胞株30－50次吧，耗时一般2分钟左右）；5） 加入适量体积完全培养基终止

正常人脐静脉原代内皮细胞培养

Ⅷ 因子抗体，荧光标记二抗，乙醇丙酮混合液（1 ： 1 ）二、实验器械1、培养皿2、培养瓶3、直剪和眼科剪4、眼科镊和止血钳5、 10ml 注射器6、玻璃滴管7、烧杯8、 15ml 离心管三、实验流程取材↓洗涤脐带外血渍, 将胶带剪为15cm 左右长↓PBS 灌 洗，去掉淤血↓推注空气，排出残存 1 × PBS （pH 7.4 ）↓注射器灌注消化液（PriCells ），至另一端有消化液流出时用止血钳截断，继续灌注消化液至 血管充盈用另一止血钳截断此端，放置到含抗生素 1 ×

利用定量数据改善细胞培养过程

观察培养物以及手动记录观察位置的时间安排。另外，由于系统能够随着时间推移监控相同位置的培养状态变化，因此可以让您确认细胞的行为和生长过程（图 3）。     当前 CM20 观察时间 取决于研究人员的日程安排 3-24 小时间隔时间 观察位置 取决于研究人员的技能和经验 固定点： 25 点（T75 细胞培养瓶） 图 2. 比较细胞测量   图 3.观察同一位置随时间发生的变化   轻松获取定量数据 通过使用图像处理和机器学习技术，CM20 监控系统还可对细胞进行计数