微孔板 U96 无菌/带盖（NUNC）

肿瘤成球实验以及肿瘤球体增殖/活力检测方案

方法。 收获细胞（保证健康的单细胞悬液）。 使用胰蛋白酶-EDTA 溶液 ( T3924 ) 分离上述贴壁细胞。Millicell® Digital Cell Imager（MDCI10000）观察到细胞融合度应为80-90%，且状态良好。 以300 x g离心细胞悬液 5分钟并吸出上清液。将细胞重悬于少量培养物中，例如 3-5 mL 的 3dGRO™ 球状体培养基 ( S3077 ) 注：可让细胞穿过40 µM细胞过滤器或带细胞过滤器卡扣盖的5 mL 圆底聚苯乙烯试管，以实现单细胞悬浮。

别小瞧了ELISA

将液体加在孔底，避免加在孔壁上部，并注意不可出现气泡。（二）保温在ELISA中一般有二次抗原抗体反应，即加标本后和加结合物后，此时反应的温度和时间应按规定的要求，保温容器最好是水浴箱，可使温度迅速平衡。各ELISA板不应叠在一起。为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿纱布的湿盒中。湿盒应该是金属的，传热容易。如用保温箱，空湿盒应预先放在其中，以平衡温度，这在室温较低时更为重要。加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便不时观察，待对照

植物蛋白芯片的构建和抗原抗体相互作用的研究

) 。 ( 3 ) 384 孔微量滴定板（Gentix，Christchurch，UK ) 。 ( 4 ) 96 孔深孔板：每孔容积 2 ml 的 96 孔微滴定板（Qiagen，Hilden，Germany) 。 ( 5 ) 96 针复制器（Nunc，Wiesbaden，Germany) 。 ( 6 ) 4 X SB 培养基：48 g/L 胰化蛋白胨，96 g/L 酵母提取物，0.8% ( V/V）甘油，120°C 高压灭菌 20 min。 ( 7 ) 20 X PP 缓冲液（磷酸钾盐缓冲