总谷胱甘肽试剂盒说明书

总谷胱甘肽试剂盒说明书
GSH（HY-60008）KIT
谷胱甘肽（glutathioneGSH）是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸结合，含有巯基的的三肽，具有抗氧化作用和整合解毒作用。半胱氨酸上的巯基为谷胱甘肽活性基团（故谷胱甘肽常简写为G-SH），易与某些药物（如扑热息痛）、毒素（如自由基、碘乙酸，铅、汞、砷等重金属）等结合，而具有整合解毒作用。故谷胱甘肽（尤其是肝细胞内的谷胱甘肽）能参与生物转化作用，从而把机体内有害的毒物转化为无害的物质，排泄出体外。谷胱甘肽还能帮助保持正常的免疫系统的功能。
检测原理：
试剂盒中含有DTNB：5,5’–二硫代–双–(2–硝基苯甲酸)，能和谷胱甘肽（GSH）反应产生2–硝基–5–甲酸和谷胱甘肽二硫化物(GSSG)，由于2–硝基–5–甲酸是一黄色产物，通过测定其在412 nm处的最大吸收可确定样品中谷胱甘肽的含量。GSSG在谷胱甘肽还原酶作用下生成GSH，GSH又和DTNB作用生成2–硝基–5–硫基苯甲酸，利用这一循环反应可提高总谷胱甘肽测定的灵敏度。
总谷胱甘肽试剂盒说明书试剂盒组成：
试剂1（R1）：去蛋白试剂 1瓶
试剂2（R2）：液体 1瓶（含谷胱甘肽还原酶）
试剂3（R3）：液体 1瓶（含 DTNB）
试剂4（R4）：液体 1瓶 （含NADPH）
标准瓶：1瓶
操作步骤：
有半自动和全自动生化仪的直接定标，空白调零，在机器上直接读取结果。
有分光光度计的，将标准品用缓冲液（R1）进行倍比稀释后在分光光度计上读取OD值，将未知标本的OD值在曲线上查出对应的浓度值。
总GSH操作步骤 单位（ul）
样品 血清 50微升 组织液100或200微升 正常值、质控：50微升
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对照管 标准管 样本
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样本 —— —— 50
蒸馏水 50 —— ——
标准品 —— 50 ——
试剂1 50 50 50
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室温 5min 3500转/分 离心 10min
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试剂2: 100 100 100
试剂3： 100 100 100
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室温 5min

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试剂4: 100 100 100
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动力学法 延迟时间 20秒 测量时间 20秒 412nm 定标3.34，直接半自动或全自动生化仪上读取结果；或者将标准品用缓冲液（R1）进行倍比稀释后在分光光度计上读取OD值，将未知标本的OD值在曲线上查出对应的浓度值。全自动或半自动生化仪直接读取数据。
总谷胱甘肽试剂盒说明书计算结果
适用于分光光度计：将标准品用缓冲液（R1）进行倍比稀释后的单位浓度为横坐标，以对应管的吸光度OD值为纵坐标作图，待测管OD值在曲线上查出对应的浓度值。（）
全自动或半自动生化仪直接读取数据，

正常参考值：
各实验室应建立自己的正常值，下列正常参考值仅供参考： 10-15umol/L
注意事项：
1. 全血标本不能有凝块。
2．每次测定对照管吸光度应比较恒定，若吸光度降低应重新配制乙酰胆碱标准液。
3．碱性羟胺加入后，须待1min以上再加酸，以保证其与乙酰胆碱充分作用。
4．此法显色不稳定，特别是室温超过20℃时影响明显。因此，室温较高时，最好于冰水浴操作，并在5～10min内比色完毕。
样品测定值超过上限，用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数。
5．本产品应在2~8℃避光贮存，避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
总谷胱甘肽试剂盒说明书本试剂盒主要技术指标：
1、线性范围：0-20umol/L
2、精密度：批内变异系数：CVw<7.3%；
批间变异系数：CVw < 10%
3、灵敏度：<0.1 umol/L