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肌酸激酶同工酶MB试剂盒使用说明书

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  • YB-50057
  • 2025年07月16日
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    • 检测方法

      酶联免疫

    • 应用

      科研

    • 样本

      血清/组织/尿液

    • 库存

      1000

    • 供应商

      钰博生物

    • 规格

      96t/48t

    肌酸激酶同工酶MB试剂盒使用说明书
    Creatine Kinase Isoenzyme MB Kit(CK-MB)
    免疫抑制法 全自动型(液体)
    适用于日立(HITACHI)系列和奥林帕斯(OLYMPUS)系列的全自动生化分析仪
    7170,7150,7060型:R1 20ml×4 R2 10ml×4
    用途:
    本试剂用于测定人血清中CK-MB的酶活浓度。
    肌酸激酶同工酶MB试剂盒使用说明书测定原理:
    CK-MB在诊断心肌梗塞时,有特异性。CK-MB有CK-M和CK-B两个亚基组成,试剂加入CK-M抗体,专一抑制CK-M亚基,然后测定CK-B亚基酶活浓度,结果乘以2,即得CK-MB的酶活浓度。
    CK
    磷酸肌酸+ADP----- 肌酸+ATP
    HK
    ATP+葡萄糖---------葡萄糖-6-磷酸+ADP
    G6PDH
    葡萄糖-6-磷酸+NADP+ -------- 6-磷酸-葡萄糖酸+NADPH+H+
    试剂盒主要成分与浓度:
    试剂
    主 要 成 分
    实验浓度
    R1
    己糖激酶(HK)
    葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)
    ADP
    AMP
    Ap5A
    NAC
    NADP
    CK-M抗体
    磷酸肌酸
    ≥3000U/L
    ≥2000U/L
    2mmol/L
    5mmol/L
    10μmol/L
    20mmol/L
    2mmol/L
    ≥2000U/L
    30mmol/L
    R2
    咪唑缓冲液(pH6.7 25℃)
    葡萄糖
    0.1mmol/L
    20mmol/L
    CK-MB质控血清 (见质控血清说明书)
    试剂稳定性:
    原装试剂在2~8℃避光保存,有效期12个月。
    样品:
    新鲜无溶血血清,肝素抗凝血浆或EDTA血浆。
    血清25℃ 1小时后CK-MB活力下降:<10%
    血清4℃ 24小时后CK-MB活力下降:<10%
    肌酸激酶同工酶MB试剂盒使用说明书操作步骤:
    波长:340nm 温度:37℃ 比色杯光径:1cm
    试剂开瓶即可使用
    空白管
    样品管
    样 品
    28μl
    蒸馏水
    28μl
    R1
    350μl
    350μl
    混匀,保温5分钟
    R2
    175μl
    175μl
    混匀,保温4分钟,准确测定1分钟吸光度变化

    计算:

    CK-MB(U/L)=(△A样品/分-△A空白/分)×F
    Vt
    F = -------------- ×1000×2 = 6270
    Vs×消光系数
    Vt = 反应总体积 Vs = 样品体积
    NADPH在340nm波长下毫克分子消光系数=6.3
    参考值:
    当以下3种情况同时存在时,心肌损伤可能性大。
    1
    CK
    >190U/L2
    >167U/L2
    2
    CK-MB
    >24U/L2
    3
    CK-MB
    酶活浓度在总CK酶活浓度的6%和25%之间1
    参考文献:
    1. Stein W.med welt,1985,36:572
    2. Calculated Values:cf,Section“Temperature Convers-
    ion Factors”
    各医院应根据本地区实际情况建立自己的正常值。
    线性上限:
    CK-MB活力可达200U/L
    肌酸激酶同工酶MB试剂盒使用说明书注意事项:
    1. 当△A/分变化率≥0.33时,用生理盐水稀释后再重新测定,结果乘以稀释倍数。
    2. 在测定CK-MB之前,先测总CK酶活浓度,如果CK酶活浓度超过1000U/L,则用生理盐水稀释样品,使之低于1000U/L,然后再测。
    3. 本产品仅用于体外诊断,内含叠氮钠,避免直接接触皮肤和眼睛,切勿吞咽。
    4. 本产品应在2~8℃条件下贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。

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    • ELISA 提示

      ELISA 实验失败可能由多种因素造成。在实验前阅读并充分了解产品说明书,可以一定程度上避免出现意想不到的结果。参考以下提示来避免实验出现问题。 1. 检查试剂的保质期,保证所有试剂按说明书上的建议正确保存; 2. 检查试剂溶液是否存在不稳定或降解迹象,如沉淀或变色等; 3. 底物溶液应为无色; 4. 试剂制备和保存时应使用干净的一次性塑料吸量管、枪头和容器。每次加液(样品、标准品及其他试剂)时,及时更换枪头,避免交叉污染; 5. 确保孵育时间和温度与规定的高度一致; 6. 中试剂不能

    • CK-MB的检测结果大于CK的原因

      -MB则由于其本身的不稳定性,市面上CK-MB的校准品或质控品较少见,而且其价格也较其他酶类校准品高得多。因此,一般医院都未使用CK-MB校准品和质控品,而是采用厂家试剂盒使用说明书提供的理论因素,在理论因素设置时,不同仪器略有差异。大多仪器理论因素设置与测定结果的小数位数无关,因而可随便设置,而有些仪器则不然,如日立生化分析仪,其结果的小数位数与因素直接相关,存在10n(n为整数)倍数关系。因此,在该类仪器上凡是使用理论因素的检测项目其结果保留的小数位应与理论因素保持一致,否则将会出现检测结果缩小或放大10n倍

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