人外周血循环稀有细胞差减富集试剂盒（适用于后续 iFISH

DNA甲基化研究方法的回顾与评价（上）

化状态有三种：持续的低甲基化状态,如管家基因；去甲基化状态,如发育阶段中的一些基因；高度甲基化状态,如女性的一条失活的X染色体[4]。 哺乳动物中，CpG序列在基因组中出现的频率仅有1%，远低于基因组中的其它双核苷酸序列。但在基因组的某些区域中，CpG序列密度很高，可以达均值的5倍以上，成为鸟嘌呤和胞嘧啶的富集区，形成所谓的CpG岛[5]。通常，CpG岛大约含有500多个碱基。 在哺乳动物基因组中约有4万个CpG岛，而且只有CpG岛的胞嘧啶能够被甲基化[6]，CpG岛通常位于基因的启动子区或是第一

实时定量PCR用于基因的定量分离

似的拷贝模板，而且其他反应的产物会产生比目的产物更多。这是为什么PCR反应终止时候的产量总是难以确定。能够对在PCR反应正在聚集的过程中产量的进行测量，或者能够实时的测量，那么就能够在PCR指数期反应的时候测量某一个点的产物的量。也只有通过指数期反应外推回去才能够知道起始的模板的数量。在实时PCR反应的指数期通过所有样品的比较而确定了一个荧光信号起始值。这个起始值能够作为参照的荧光值,并且当样品信号明显的大于参照的荧光值这个荧光信号起始值就被绘在图上。因此，PCR循环的每一个部分需要产生足够的荧

DNA甲基化研究方法的回顾与评价(图)

有三种：持续的低甲基化状态,如管家基因；去甲基化状态,如发育阶段中的一些基因；高度甲基化状态,如女性的一条失活的X染色体[4]。哺乳动物中，CpG序列在基因组中出现的频率仅有1%，远低于基因组中的其它双核苷酸序列。但在基因组的某些区域中，CpG序列密度很高，可以达均值的5倍以上，成为鸟嘌呤和胞嘧啶的富集区，形成所谓的CpG岛[5]。通常，CpG岛大约含有500多个碱基。在哺乳动物基因组中约有4万个CpG岛，而且只有CpG岛的胞嘧啶能够被甲基化[6]，CpG岛通常位于基因的启动子区或是第一个外显