TLRS-4样受体放免试剂盒说明书

TLRS-4样受体放免试剂盒说明书
TLRs-4（HY-10276） RIA KIT
Toll样受体家族（Toll-like receptors, TLRs）成员属模式识别受体（Pattern recognition receptor,PRR），是重要的天然免疫分子。目前对其研究主要集中在对细菌及病毒的识别机制上，并被视为联系天然免疫与获得性免疫之间的桥梁。目前，在哺乳动物及人类中已经发现的人TLRs家族成员有11个。根据TLRs细胞分布特征，可将其分为普遍存在型(TLR1)、限制存在型(TLR2、TLR4、TLR5)及特异存在型(TLR3)3类。TLR4(Toll-like receptors-4, TLRs-4）的组织分布广泛，血管内皮细胞、单核细胞、中性粒细胞、树突状细胞、小肠上皮细胞、人齿龈纤维母细胞、人子宫颈平滑肌细胞、呼吸上皮细胞、大鼠脾和心肌细胞等都有表达，是发现最早的TOLL受体亚型之一，是天然免疫系统识别病原微生物的主要受体，是机体识别并启动炎症反应的始动因素，控制着炎症信号进入细胞内的通路，在脂多糖诱导的炎症反应中发挥关键作用。

标本的收集：空腹抽静脉血2ml离心取血清，-20℃保存三个月。

该药盒主要应用范围：
* 抗病毒的研究
* 免疫系统疾病的研究
TLRS-4样受体放免试剂盒说明书药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1、 TLRs-4缓冲液1瓶
2、 TLRs-4（第二抗体）1瓶，用前充分摇匀。
3、 TLRs-4标准品5瓶，浓度为2.5、50、10、20、40ng/ml
4、 TLRs-4抗体 1瓶。
5、 125I–TLRs-4 1瓶

测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：
TLRs-4 RIA加液程序 （单位： ul ）
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
¹²⁵I- TLRS-4 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温放置15分钟后，3500 转/分 4℃离心20 min，弃上清液，测沉淀cpm数。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。
注意事项：
本月标准品每瓶用 ml 缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液溶解
本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
TLRS-4样受体放免试剂盒说明书本试剂盒主要技术指标：
1、 NSB：<5%
2、 灵敏度：<0.25 ng/ml。
3、 标准曲线范围：2.5-40ng/ml
4、 批内变异系数：CVw<7.5%；
批间变异系数：CVw <10% 。
5、 正常参考值：4.2±1.5ng/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。

本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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