红细胞阴离子交换蛋白1放免试剂盒说明书
AE1(HY-10254) RIA KIT
红细胞阴离子交换蛋白1 (anion exchanger,AE1) 是红细胞膜上含量最为丰富的蛋白质,约占膜蛋白含量的25%,其主要介导Cl- /HCO-3的跨膜转运,又称带3 蛋白( band 3 protein)。每个红细胞膜上约有106 个拷贝,它的分子量约为101kD,由911个氨基酸组成,属于阴离子交换蛋白家族中的一员。它有以下生理功能:(1) 参与Cl- /HCO-3交换(2) 参与O2与CO2的运输( 3 ) 维持红细胞的形态(4) 参与红细胞内的糖酵解调节(4)可以识别和清除衰老红细胞,对血型的决定也十分重要(5)参与细胞增殖和凋亡过程。研究证明体力活动与红细胞阴离子交换蛋白关系密切。
测定原理:本药盒应用放射免疫分析方法测定。根据竞争机制原理,125I-AE1与抗体的结合量与标准或样品中的AE1的含量呈一定函数关系。用免疫分离剂(PR)将结合部分(B)与游离部分(F)分离后,测定结合部分的放射性强度,通过数据处理可求出样品中AE1的浓度值。
药盒应用:
高血压病的研究
糖尿病的研究
红细胞阴离子交换蛋白1放免试剂盒说明书药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1、 缓冲液(PBS)1瓶。
2、 PR分离剂(第二抗体)
3、 AE1抗体1瓶:用前充分摇匀
4、125I- AE1标记 1瓶:
5、AE1标准品5瓶,浓度为6.25、12.5、25、50、100pg/ml
测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
AE1 RIA加液程序 (单位: ul )
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 100 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- AE1 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀,室温15分钟, 3500 转/分 4℃离心20分钟,吸弃上清液,测定沉淀cpm数。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值, 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
红细胞阴离子交换蛋白1放免试剂盒说明书注意事项:
本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本月分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标:
1. NSB:6%
2. 灵敏度:<0.625pg/ml
3. 标准曲线范围:6.25~100pg/ml
4. 批内变异系数:CVw<8.2 %。
5. 批间变异系数:CVw < 10.0% 。
6. 正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
16.5±5.1pg/ml(n=25)。
本次药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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