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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
-
- 库存:
50万
- 供应商:
镜像绮点
- 肿瘤类型:
否
- 细胞类型:
原代细胞
- 品系:
原代细胞
- 组织来源:
软骨组织
- 相关疾病:
否
- 物种来源:
组织
- 免疫类型:
否
- 细胞形态:
长梭形细胞
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 器官来源:
软骨组织
- 运输方式:
冻存/复苏
- 年限:
长期
- 生长状态:
贴壁生长
- 规格:
1ml/T25
细胞详述
软骨细胞存在于关节软骨中,负责分泌II型胶原和其它类型的胶原以及非胶原的细胞外基质大分子。成软骨细胞的增殖和分化与脊椎动物骨架的发育有着密切的关系。软骨细胞能分泌和响应一系列的生长因子,包括IGF-1和IL1。体外培养的软骨细胞是研究软骨修复和关节炎病理的有用模型。
细胞特性
1) 细胞来源于人类风湿关节炎患者软骨组织。
2) 细胞鉴定:Ⅱ型胶原(Collagen Ⅱ)免疫荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式:长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用iCell原代软骨细胞培养体系(产品编号:PriMed-iCELL-020)作为体外培养原代人类风湿关节炎患者软骨细胞的培养基。
产品的运输和保存
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
产品使用
1)本产品仅能用于科研
2)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3)本产品未通过用于活体诊断的审核
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文献和实验、 miRNA靶基因的验证与miRNA靶基因 的预测方法相比,对miRNA靶基因进行实验验证的方法并不多,目前还没有一个快速、简便、高通量的鉴定方法。最直接的鉴定方法是, 利用荧光定量PCR及Westernblot方法分别检测转染或敲低miRNA后细胞中mRNA水平及蛋白水平的变化,从而确定miRNA与靶基因的对应关系。这种方法能够直接鉴定出miRNA的靶基因, 准确度高但不能鉴定miRNA的靶位点。转染或敲低miRNA:方式主要有两种,一种是构建miRNA过表达载体的稳定表达系统,一种是人工合成miRNA
固定和透化 在培养板中将已爬好细胞的盖玻片用 1 × PBS 浸洗 3 次,每次 3 min。 用 4% 的多聚甲醛固定爬片 15 min,1 × PBS 浸洗玻片 3次,每次 3 min。 0.5%Triton X-100(1× PBS 配制 )室温通透细胞 15 min(细胞膜上表达的抗原省略此步骤), 1 × PBS 浸洗玻片 3 次,每次 3 min。 封闭 吸水纸吸干 1 ×PBS,在玻片上滴加 5% 的正常血清(与二抗种属来源一致或相似),室温封闭 1 h
关于如何鉴定收到的新细胞是否有污染,很多站友,特别是新接触细胞培养的站友通常没有太多经验,在此我分享下我这边接收到新细胞后是如何判断是否有污染的。一、肉眼观察以下几项:1. 细胞瓶身:如果瓶身上没有裂缝,正常;如果瓶身上有裂缝,则污染几率非常大。2. 培养基颜色:如果培养基颜色是红色或者粉色,正常;如果是橙色,则可能是污染或者细胞过密;如果是黄色,则污染几率非常大。3. 培养基澄清度:如果培养基澄清,正常;如果有少许漂浮物,则可能是污染或者有细胞凋亡;如果培养基很浑浊,甚至出现絮状物,则污染
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