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HCT116+GFP 人结肠癌细胞绿色荧光标记

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  • 上海
  • 2026年01月26日
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      HCT116/GFP

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      100

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    • 肿瘤类型

      结直肠癌

    • 细胞类型

      -

    • 品系

      细胞系

    • 组织来源

      结肠癌

    • 相关疾病

      结直肠癌

    • 物种来源

      组织

    • 免疫类型

    • 细胞形态

      上皮细胞样

    • 是否是肿瘤细胞

      -

    • 器官来源

      结肠癌

    • 运输方式

      冻存/复苏

    • 年限

      长期

    • 生长状态

      贴壁生长

    • 规格

      1ml/T25

    细胞介绍

    HCT116是1979年M.Brattain等从患结肠癌的男性病人中分离的三株恶性细胞之一。 在半固体琼脂糖培养基中形成克隆。HCT116在无胸腺的裸鼠有致瘤性,形成上皮样的肿瘤。该细胞通过慢病毒转染的方式携带GFP基因。

    细胞特性

    1) 来源:结直肠癌

    2) 形态:上皮细胞样,贴壁生长

    3) 含量:>1x10^6  细胞数

    4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

    5)  用途:仅供科研使用。

    细胞筛选

    该细胞为已经构建好的稳定转染GFP的细胞,随细胞传代次数的增加,其GFP荧光强度会逐渐减弱。若实验要求需要维持荧光强度,可以加入嘌呤霉素进行再次筛选。建议收到细胞后至少传3代,冻存留种后再进行筛选。

    初次进行细胞筛选时,建议加入终浓度为1ug/ml嘌呤霉素的完全培养基维持培养,若无细胞漂浮或者漂浮较少,即可更换为含2ug/ml嘌呤霉素的完全培养基继续筛选,以此类推,至最高药物浓度为5ug/ml。若筛选过程中,漂浮细胞大于60%,则停止筛选,换成正常培养基培养,至细胞密度约80%,可继续加入同浓度嘌呤霉素进行筛选。当加入5ug/ml嘌呤霉素时细胞正常增殖,可停止筛选,用不含药完全培养基正常培养。

    一.培养基及培养冻存条件准备

    1) 准备McCOY's 5A(推荐iCell-0011) 培养基;优质胎牛血清,10%;双抗1%。

    2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

    3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

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