中介素放免试剂盒说明书

中介素放免试剂盒说明书
IMD（HY-H0041） RIA KIT
中介素(Intendedin)是降钙素基因相关肽超家族的新成员，可非选择性结合于该家族的共同受体即降钙素受体样受体/受体活性修释蛋白系统，具有广泛的生物学效应，在调节心血管、消化、泌尿、呼吸以及神经内分泌功能等方面有着重要的作用，开展对中介素的相关基础和临床研究将有着重要的理论和实践意义。最初发现的中介素（Intermedin,IMD）是低等脊椎动物垂体中间部产生的一种肽类激素，主要作用天黑素细胞生黑色素。2004年国外学者先后发现IMD属降钙素基因相关(calcitonin gene related peptide，CGRP)超家族成员，其结构功能与同家族的超家族成员肾上腺髓质素(adrenomedullin，ADM)有许多相似性，故又称为ADM2。目前发现，IMD的分布广泛，作用涉及多个系统，因此其生物学效应和功能越来越受到关注。
中介素可通过多种信号通路促进肿瘤血管生成，并受肿瘤细胞缺氧影响表达增加。近年来，国内外出现多项中介素与肿瘤发生、发展、侵袭之间相互关系及作用机制的研究，目前国内外的研究多集中于IMD对肿瘤血管的作用，缺氧等对其的影响等基础研究，缺乏各种组织来源的肿瘤细胞表达IMD的相关研究及大规模临床试验研究，对于其作用于肿瘤细胞的具体机制、信号通路与受体之间的相互关系等尚需进一步研究。IMD可通过多种途径影响VEGF，调节肿瘤血管生成，因此有望成为新的抗肿瘤药物的作用靶点。
参考药盒组成：
1、IMD标记一瓶 。
2、IMD抗体一瓶。
3、缓冲液一瓶。
4、分离剂（第二抗体）一瓶。
5、IMD标准品1瓶：用缓冲液稀释成800、400、200、100、50、25pg/ml。
中介素放免试剂盒说明书标本采集：
取静脉血2ml注入含10%EDTA.Na2 30ul和抑肽酶20ul的试管中，混匀4℃，3000rpm/ min离心10min，分离血浆（溶血样品影响测定结果）。如需要可分装2-3份保存，放-20℃可保存2个月。在-70℃可保存半年。测定前，使样本置于室温或冷水中复融，再次4℃，3000rpm/ min离心5min，取上清测定
测定方法：
IMD RIA 操作程序 单位：ul
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试 剂 T NSB S0 S1~ S6 样 品
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缓 冲 液 —— 200 —— —— ——
零 准 品 —— —— 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— ¬—— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
¹²⁵I-IMD 100 100 100 100 100
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混匀，4℃ 保温16~24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，静置15分钟，3500转/分 离心20分钟，去上清，测沉淀CPM。
中介素放免试剂盒说明书结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测物结合百分率，在半对数座标纸上绘制标准曲线，并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
注意事项：
本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本试剂盒主要技术参数：
测定范围：25~800pg/ml
灵敏度：〈5pg/ml。
精密度：批内CV<4.1%,批间CV<8.4%
准确度：回收率97~104%，平均回收率96.5。
正常参考值：
各实验室应建立自己的正常值，下列正常值仅供参考：60-150pg/ml
注意事项
1、缓冲液和免疫分离剂使用前必须摇匀，不可冰冻保存。
2、标记品请在使用前溶解和配制。
3、用户如遇特殊情况，收到药盒后不能在有效期内使用，除标记品外，其他全部试剂存在4℃，待下次临用前预购一瓶标记品即可。
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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