血清骨钙素放免测定盒操作说明书
BGP(HY-10160) RIA KIT
骨钙素(Osteocalcin)又称骨Υ-羧基谷氨酸蛋白(BoneΥ-carboxyglutamic acid BGP),为骨组织中一种非胶原蛋白质,是成骨细胞产生的一类多肽物质。研究表明,血清BGP浓度变化对临床上骨疾病以及某些内分泌代谢性骨病发病机理研究有着重要的意义。
试剂盒组成:
1、 BGP标记一瓶。
2、 BGP抗体一瓶。
3、 缓冲液一瓶, 用蒸馏水稀释至50ml。
4、 分离剂(第二抗体)一瓶。
5、 BGP标准品五瓶1、2、4、8、16ng/ml。
样品收集: 按常规静脉采血,分离血清后,-20℃保存备用。
血清骨钙素放免测定盒操作说明书 操作方法:
BGP RIA 操作程序 (单位:ul)
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 标 本
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- BGP 100 100 100 100 100
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充分混匀,4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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充分混匀,室温放20分钟,4℃3500转/分离心20分钟,测沉淀CPM。
注:测定兔标本时,应改用20%PEG 作分离剂,每管加500ul,NSB、S0、S1~S5
管补加正常人血清100ul/管。样品管补加缓冲液(PBS)各100ul/管。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。组织样品乘法以稀释倍数,再换算成ng/ml组织。
注意事项:
本月标准品每瓶用 0.5 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 10.5 ml缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 5.5 ml缓冲液释释
本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标
1、NSE:1.8%
2、BGP抗血清与心钠素、内动素、甲状旁腺素、降钙素及血管紧张素Ⅱ等均无 交叉反应。
3、准确性:分别于每 ml血清中加入不敷出10ng和15ng两种BGP标准浓度,
测定回收率分别为90.2% (n=10)和88.2%(n=10)。
4、精密度:批内变异系数:2.61%( n=10);
批间变异系数:5.74%。
5、灵敏度:0.22pg/管( 0.22ug/L )。
6、标准曲线范围:1~16ng/ml。
7、正常参考数据:4.75±1.33ug/L。
血清骨钙素放免测定盒操作说明书本月药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% 0.2 B0/T% 50 B/ B0 % 84 67 51 28 17
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