促红细胞生成素放免药盒操作说明书
EPO(HY-10095) RIA KIT
促红细胞生成(Erythropoietin EPO)由193个氨基酸组成,分子量为34000D糖蛋白。胎儿几乎均由肝脏产生,成人主要产生于肾脏近曲小管细胞和肾皮质、外层髓质的小管周围毛细内皮细胞。正常状态下肝脏分泌量占10~15%。EPO在肾脏、肝脏不能储存,当机体需要量增加时,只能依赖其合成增加。影响EPO生物合成的主要因素是机体的供氧情况:当过度输血或自发性红细胞生成增多等引起供氧增加时,血清EPO水平下降;而动脉血氧分压降低或红细胞数量减少造成缺氧时,则可使EPO的合成迅速增多。EPO生物学作用:增加原始、早幼、中幼阶段红细胞,降低骨髓转化时间,使发育的前期红细胞数目、网织红细胞数目增加,并使血小板增加,并刺激多能造血干细胞。最近研究证明:EPO与TPO(血小板生成素Thrombopoietin TPO)有协同作用,共同维持机体生理功能。根据免疫竞争原理,用非平衡法建立了直接检测血清EPO水平的放射免疫分析方法。
该药盒主要应用范围:
* 血液病的研究
* 肾病尤其是肾性贫血的研究、肾移植成活的监测
* 血液流变学的研究
* EPO治疗前后的血药浓度观察及疗效监测。
试剂盒组成:
1、EPO标记一瓶; 2、EPO抗体一瓶;
3、EPO标准品六瓶:0、5、12、60、160、320mIU/ml;
4、缓冲液一瓶,去激素血清一瓶 ; 5、分离剂(第二抗体)一瓶。
促红细胞生成素放免药盒操作说明书标本收集:空腹抽静脉血2ml 离心取血清-20℃保存三个月。
测定方法:
EPO RIA 操作程序(单位:ul)
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 300 —— —— ——
O 标 准 —— —— 200 —— ——
标 准 品 —— —— —— 200 ——
样 品 —— —— —— —— 200
抗 体 —— —— 100 100 100
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摇匀室温放置2小时
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125I- EPO 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀,室温放置30分钟后,3500 转/分 离心15分钟,去上清,测沉淀cpm值。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB,S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,
在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
促红细胞生成素放免药盒操作说明书注意事项:
本月药盒抗体每瓶用 10 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 10 ml缓冲液稀释
本月标准品每瓶用 --------- ml去激素血清稀释
“O”标准不稀释
本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
正常参考值:13.1±5.45mIU/ml(n=50)
本月药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% 3.8 B0/T% 47. 15 B/ B0 % 98.05 87.26 77.06 61.13 46.59
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